刺参(Aposichopus japonicus)在氨氮胁迫下解毒代谢途径与生理健康评价技术的研究.pdf

谨以此论文献给我的父母、导师和所有关心帮助过我 的朋友们！ 王国辉 万方数据 万方数据 万方数据 刺参(Apostichopus japonicus)在氨氮胁迫下解毒代谢途径与 生理健康评价技术的研究 摘 要 氨氮是养殖水环境中重要的污染胁迫因子。本文通过研究刺参在氨氮胁迫下 解毒代谢相关基因的表达分析、酶活性和含氮化合物含量变化，以及免疫和抗氧 化指标的变化情况，初步探讨了刺参在氨氮胁迫下的解毒代谢机制和生理健康水 平，主要包括三方面内容：(1)刺参谷氨酸脱氢酶(GDH) 、谷氨酰胺合成酶(GS) 基因片段的克隆和序列分析；(2)刺参在氨氮胁迫下体内氨转运和代谢途径的研 究；(3)氨氮胁迫对刺参免疫和抗氧化指标的影响。主要结果如下： 1 刺参氨氮解毒代谢相关基因片段的克隆和序列分析 本文以刺参呼吸树为模板，利用 COEDHOP 网站和 Primer Premier 5.0 设计 简并引物，通过 RT-PCR 扩增技术，克隆了刺参 GDH 基因和 GS 基因的部分序 列。其中，GDH 基因片段长 693bp，编码 231 个氨基酸，通过氨基酸同源性分 析发现其与点蜂缘蝽(Riptortus pedestris) 的相似性最高，为 78%，GeneBank 注册 号为 KJ839834 ；GS 基因片段长 636bp ，编码 212 个氨基酸，其与普通海胆 (Paracentrotus lividus) 的相似性最高，为 78%，GeneBank 注册号为 KJ839835 。 2 刺参在氨氮胁迫下体内氨转运和代谢途径的研究 本实验梯度设置为：对照组 （自然海水--0.01mg/L ）