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抗铬菌株的筛选定及其对麦田铬污染土壤修复效应研究.pdf
摘要
随着现代工业、农业、交通运输业的迅速发展,土壤重金属污染越来越严重,土壤
中的重金属不仅影响农作物的生长,降低农作物的产量和品质,而且还会通过食物链危
机到人类的健康和生命。因此治理土壤重金属污染,已成为亟待解决的问题。而微生物
修复技术作为一种高效的生物修复技术,在治理重金属污染方面颇具有潜力。
首先,本研究通过驯化、筛选和分离技术,从污染的土壤中获得两株对铬具有较高
抗性的菌株A和B,它们对cr3+的最高抗性分别为450
mg/L和500mg/L,对Cr6+的最
高抗性分别为200
mg/L和220mg/L。菌株A是革兰氏阳性两端钝圆的短杆菌,有芽孢,
菌落乳白色、圆形或近似圆形、表面光滑湿润、边缘不整齐、质地软、稍有光泽,其生
理生化特性与芽孢杆菌属相似;经16S
状芽孢杆菌(Bacilluscereus)的相似性最高达99%,故将A鉴定为蜡状芽孢杆菌。菌
株B菌落疏松,呈棉絮状,最初呈白色,后变成灰褐色,2d内长满整个平板,在显微
镜下观察,孢子囊呈球形,有假根,孢子呈球形或近似球形,其形状、大小不等;经18S
oryzae)类群的相似性达到了99%,故
rDNA序列分析表明菌株B与米根霉(Rhizopus
将B鉴定为米根霉。对抗铬菌株A和B的生长条件进行研究,结果表明菌株A和B的
mL(250
最适pH均为7;最适温度均为30℃;最佳装液量均为80一100mL摇瓶);在
Cr3+初始浓度为100、200、300、400和500
mg/L时,菌株均能生长,但高浓度的Cr3+
对菌株的生长有一定的抑制作用。对菌株A和B对Cr3+的生物吸附进行研究,结果表
明在培养时间一定时,随着Cr3+初始浓度的增加,菌株对cr3+的吸附率减少,而生物吸
附量则逐渐增大;在C,初始浓度一定时,随着培养时间的延长,菌体对C,的吸附率
呈现出先增加后减少的趋势,这与生物吸附量的变化趋势基本一致。
其次,采用水培试验方法分别研究了抗铬菌株Bacillus
cereus和Rhizopusoryzae对
Cr3+胁迫下小麦幼苗生长、各部分镉积累量以及对小麦幼苗叶片几项生理生化指标的影
响。结果表明:C,+对小麦幼苗的生长有抑制作用,且随着处理液Cr3+浓度的增加,抑
制作用越明显。抗铬菌株菌悬液的加入,使小麦生长受到Cr3+胁迫的抑制作用有所缓解,
其中小麦叶长、根长及其干重都有不同程度的增加。叶和根系铬积累量随处理液cr3+浓
度的增加而增加,且根系铬积累量叶铬积累量。加入抗铬菌株菌悬液后,小麦幼苗叶
和根系铬积累量与未加菌组相比都有一定程度的降低。Bacillus
cereus的加入使小麦幼
oryzae
在Cr”胁迫下,小麦幼苗叶片中MDA含量随处理液中cr3+浓度的增加而增加;根系活
力、叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量的含量均随处理液中Cr3+浓度的增加而降低;而
T
液后,小麦幼苗叶片MDA含量有所降低,根系活力和三种叶绿素含量都有一定程度的
升高,SOD和POD活性在一定程度上有所恢复。
再者,针对抗铬菌株对铬污染土壤的修复效果的研究,本试验采用温室盆栽的方法,
以小麦为供试植物,Bacillus oryzae为供试菌株,研究在外源铬污染
cereus和Rhizopus
条件下,这两菌株不同配比处理下对小麦生长及富集铬的影响,以确定菌株的最佳配比。
在最佳配比前提下,研究接入不同质量的混合菌剂对小麦生长及富集铬的影响,以确定
混合菌剂的最优添加量。在最
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