异种移植策略筛前列腺癌血清学标志物的初步研究.pdf

摘要 摘 要 目的初步建立裸鼠前列腺癌皮下肿瘤模型，筛选前列腺癌的血清学检测 标志物。 方法首先通过手术的方法，建立了昆明小鼠的肾包膜异种移植模型；通 过培养LNCaP细胞，将细胞注射到BaLB／c．nil的皮下，建立裸鼠皮下细胞注射 成瘤模型；将皮下细胞注射成瘤得到的瘤块，采用手术移植的方法，移植到 BaLB／c．nu的前肢腋窝皮下，建立了裸鼠皮下瘤块移植成瘤模型。将成瘤的裸鼠 血清，进行游离PSA和总PSA含量水平检测；用成瘤BaLB／c-nu血清、未成瘤 BaLB／c-nu裸鼠血清作为抗原免疫同系BaLB／c免疫正常鼠，制备抗前列腺癌特 异分泌蛋白抗体，将此抗体作为一抗，对LNCaP细胞甩片等做免疫组化实验， 检测抗体生成情况；将成瘤BaLB／e-nu血清、未成瘤BaLB／c-nu血清、前列腺增 生病人血清和前列腺癌病人血清做蛋白质电泳，以免疫实验得到的两种抗血清 作为一抗，检测抗血清中抗人前列腺癌特异蛋白抗体的生成情况。 结果BaLB／c-nu裸鼠细胞注射成瘤裸鼠血清中有很高的PSA含量；以成 瘤裸鼠血清作抗原，经免疫实验后得到的抗血清；以未成瘤裸鼠血清作抗原， 经免疫实验得到的抗血清，都可以使LNCaP细胞产生阳性染色，阴性对照未免 疫鼠血清免疫组化结果为阴性；WestBlot实验结果表明，裸鼠体内含有鼠源抗 体成分。 结论 以BaLB／c．nu皮下细胞注射成瘤的裸鼠模型，其血清中可积累高浓度 的PSA，以成瘤BaLB／c-nu裸鼠血清作抗原，免疫同系BaLB／c免疫正常鼠可以 产生大量抗体。 关键词 裸鼠模型血清免疫抗血清 Abstract aBaLB／c—numousesubcutaneouscell objectives：Establish injectionprostatic carcinoma tofilternewPCabloodserumbiomarker． model，aim Methods：FirstWe a mouse method，establishKunming adoptedoperative LNCaP these modal；cultured kidneyenvelopehetcrotransplantation cells，injected of Weestablishedacell cellsintosubcutaneoustissueBaLB／c-numice，SO subcutaneousBaLB／c—numicePCa thetumorintosmallerbits injection model；cut micesubcutaneoustissuetoestablisha and thebitsintoBaLB／c．nu implanted micetumorbit obtainedthesel2]mof BaLB／c-nu implantmodel；We tumorigenesis totalPSAflee intheserum．weused nudemouseanddetectedtheLevelof and PSA