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改良的大豆子叶节转基因方法 中文摘要 中文摘要 随着基因工程技术的发展，采用遗传转化导入外源基因，改善大豆品质及抗 病抗逆性，已成为大豆改良的重要方法之一。本文从多个层面对转基因方法的原 理和进展作了详细综述，最终选取相对高效的农杆菌介导法作为大豆转基因的基 础研究方法，并从种子消毒，外植体选择，农杆菌侵染和共培养，以及各培养时 期植物激素种类和浓度等方面作了分析研究，以探讨大豆转基因优化研究步骤， 以期在一定程度上达到提高转基因效率的目的。 文章以苏云金芽孢杆菌(Bacillus 研究未进行转染时期11种不同硼酸浓度处理对大豆子叶节丛生芽再生的影响，再 从中选取代表性的硼酸浓度处理诱导期转染的大豆，观察三种硼酸浓度对大豆再 生丛生芽转基因的影响，结果表明不加入硼酸时表现为严重缺硼症状，不仅生长 点没有长出，而且根的生长也受到严重抑制。结果表明高浓度硼酸有较多的愈伤 组织形成，外植体短期内容易死亡，不利于转基因丛生芽的再生。适宜浓度硼酸 培养基诱导的大豆丛生芽长势最好，而且转基因效率也高达3．3％。对大豆抗性幼 苗的根和叶片分别采用PCR、逆转录PCR和Southem blotting等方法进行筛选与 鉴定，结果均获得阳性幼苗，证明外源基因已经成功转入大豆基因组中。 关键词；大豆；转基因；农杆菌；硼酸；丛生芽 作 者：李海芬 指导老师：孟祥勋 to Technology Transgenic Improved Node max)Cotyledonary Abstract have forcrop unprecedentedpotential Plant techniques engineering genetic hasbeen inthe transformation ofgenetic applied improvement．Thetechnique in onthe resistance principle of anddisease soybean．Based seed’quality improvement was the technique of agrobacterium—mediated and technology advatagestrans