甲基化micrRNAMLL-AF4融合蛋白调控通路参与急性淋巴细胞白血病发生发展的机理研究.pdfVIP

摘要 摘要 目的：彪U(mixedleukemia)基因异常是急性白血病中一种非常常 lineage 见的染色体异常，大多数发生膨比基因异常的急性白血病预后很差，是血液病 研究领域的热点。MLL．AF4阳性的急性淋巴细胞白血病是成人急淋中是仅次于 融合基因，多数患者对常规化疗耐药，即使行异基因造血干细胞移植也容易复 发，是一个独立的预后不良因素。目前其发病机理不清，也缺乏有效的靶向治 疗措施，亟需从分子机制揭示致病机理。本研究旨在探讨MLL．AF4阳性急性 参与MLL．AF4阳性白血病发生发展的机理。为难治复发型白血病提供新的治 疗靶点，并为去甲基化药物治疗MLL．AF4阳性急性淋巴细胞白血病奠定理论 基础。 融合基因的3UTR(Untranslated RT-PCR及Western 1及MV4．11中，转 及蛋白水平变化。MLL．AF4阳性急性白血病细胞系RS4；1 胞周期及细胞分化等的影响。实时定量RT-PCR检测MLL．AF4阳性急性淋巴白 血病细胞系及其他白血病细胞系中microRNA的表达情况，硫化测序检测 l及MV4．11，进一步探究表观遗传学调控MLL-AF4表达的机制。 细胞系RS4；1 合基因表达。实时定量RT-PCR及WesternBlot证实miR．143异常高表达后 l及MV4．1l中异常高表达miR．143，可以抑制细胞增殖，诱导细胞 胞系RS4；1 摘要 情况，发现MLL．AF4阳性急性淋巴细胞白血病中miR．143表达出现特异性下 调，明显低于健康人及不携带MLL-AF4融合基因的其他类型白血病。硫化测序 表明在MLL．AF4阳性急性白血病中，miR．143启动子区出现异常高甲基化。去 甲基化药物处理MLL．AF4阳性急性细胞白血病细胞系后，细胞明显凋亡，同 时miR．143表达上调，加用miR．143抑制剂后可以部分逆转去甲基化药物引起 的细胞凋亡。 结论： 人类miR．143是一个抑癌基因，它可以特异性下调MLL．AF4融合 蛋白，而且在MLL．AF4阳性急性淋巴细胞白血病中出现特异性高甲基化及低 表达，从而加剧白血病细胞恶性增殖。体外转染导致异常高表达miR．143，可 以诱导MLL．AF4阳性的白血病细胞凋亡，抑制增殖，是一个潜在的治疗靶点。 去甲基化药物可以通过上调miR．143表达诱导细胞凋亡，从而为去甲基化药物 治疗MLL．AF4阳性急性淋巴细胞白血病奠定理论基础。 关键词： MLL．AF4，miR．143，甲基化，白血病 Abstract Abstract is common very leukemia)geneabnormality Objectives：MLL(mixedlineage mostacuteleukemiawithabnormalMLL have inacuteleukemia．Since patients gene ofthe in a mechanism abnormality verypoorprognosis，thepathogenic gene leukemiais ahot MLL-AF4fusion is by becomingtopic．The