重组人乳铁蛋白表达纯化及其功能研究.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 的糖蛋白，也是近年来在抗癌和抗炎症领域比较受关注的一种具有潜在药物开 发价值的蛋白。目前，从几种哺乳动物的乳汁或者初乳中提取出来的天然的LF 已经用作商业用途，并且重组乳铁蛋白(rLF)己从病毒、真菌、细菌、昆虫、 植物和动物表达系统中表达并大量纯化。本研究利用家蚕生物反应器系统成功 的表达出具有生物活性的重组人乳铁蛋白(rhLF)，采用免疫亲和层析的方法对 家蚕血淋巴内的rhLF进行了纯化，质谱鉴定结果与NCBI数据库里所提交的人 乳铁蛋白的氨基酸序列一致性为100％，rhLF分子量为78 kDa,略低于天然的人 乳铁蛋白，有可能是由于家蚕体内存在着相对于人体的不完全的糖基化修饰。 本研究在纯化rhLF的基础上，进一步比较系统的研究了rhLF的生物活性 以及功能，选取E．coliTGl菌种进行抑菌活性鉴定，同时，在体外条件下测定了 瘤细胞的最佳抑制浓度，其中对MCF．7和LoVo抑制率能达到40％，通过流式 滞G1期进而抑制MCF．7细胞的增殖，但是对LoVo是通过G2期的阻滞作用。 两种细胞均在