双氢青蒿素诱导腺癌细胞凋亡机制的研究.pdfVIP

lIllli t lllllllIIll111Ill1IllI Y1 Mechanism onthe of Study Human Dihydroartemisinin—-InducedLung AdenocarcinomaCells Apoptosis By Lu Yingying Supervisor Professor Chen Tongsheng At of CollegeBiophotonics， SouthChinaNormal University June，2010， 摘要 摘要 细胞凋亡是一种高度有序的程序性死亡的方式，它主要通过两条途径来启 动：死亡受体途径和线粒体介导的途径。因此，激活细胞凋亡途径成为抗癌药物 研究的新热点，目前已成为抑制恶性肿瘤增殖的一种治疗手段。双氢青蒿素 的一线抗疟疾药，近年来的越来越多的研究证明，其还具有抗肿瘤的作用。虽然 前人付出了很多努力研究双氢青蒿素的抗肿瘤机制，但是双氢青蒿素对人肺腺癌 细胞的作用机制仍然不清楚。 本文第一章绪论部分总结了凋亡信号转导通路的研究现状，概述了双氢青蒿 素目前的国内外研究现状，荧光能量共振转移(FRET)等荧光技术的基本原理 及其应用，同时说明了本课题研究的目的和意义。 本文的实验工作主要分为三个部分： 在第一部分的实验工作中，首次采用激光扫描共焦显微成像、FRET受体漂 白技术和荧光光谱检测技术在人肺腺癌细胞(ASTC．a．1)中检测了DHA诱导细 (1)DHA以剂量与浓度依赖 胞凋]L中caspase．3的活化。我们的实验结果表明： 径可能参与TDHA诱导的细胞凋亡(包括线粒体肿胀与膜电位的下降)。本章在对 DHA诱导的人肺腺癌ASTC．a-1细胞凋亡的机制研究中取得初步的进展，对DHA 诱导ASTC．a-1细胞凋亡的后续研究奠定了良好的基础。 在第二部分的实验工作中，我们首先通过CCK-8和流式细胞仪的实验检测由 DHA诱导了ROS依赖性的细胞凋亡。基于此，我们第一次在活细胞中运用共聚 c从线粒体中释放，以及 性的Bax的转位，线粒体功能的紊乱，cytochrome 的表达的主要原因，因此，在本文中我们推狈mJROS可能是通过下调Bcl-xL来调控 DHA诱导的Bax转位。另外，我们还发现Bim，另一个Bcl．2家族中重要的促凋亡 因子，在DHA的刺激下，发生了向内质网而不是向线粒体的转位并且DHA的刺 激能明显上调BimL与BimS这两种蛋白亚型的表达。这些结果都为DHA成为可能 的抗癌药物治疗肺腺癌提供初步的理论依据。 摘要 在第三部分的实验工作中，我们证明SP600125，JNK的抑制剂，通过加速 Bax的转位和随后的线粒体膜去极化，cytochrome 的活化的内源性凋亡途径，协同促进双氢青蒿素诱导的人类肺腺癌细胞凋亡。 加速双氢青蒿素