家蚕卵色限性品(W-1)蚕卵的发育后期及蚁蚕蛋白质组的研究.pdfVIP

家蚕卵色限性品种(w．1)蚕卵的发育后期及蚁蚕蛋白质组的研究 中文摘要 家蚕卵色限性品种(w-1)蚕卯的发育后期 及蚁蚕蛋白质组的研究 中文摘要 家蚕是完全变态昆虫，一生中要经过卵、幼虫、蛹和成虫4个形态完全不同的发 育阶段。对卵期胚胎发育不同时期的蛋白质时间和空间的表达差异已经有大量的研 究，但对家蚕卵期和蚁蚕性别差异性表达的研究报道很少。 本研究利用双向电泳和质谱相结合的蛋白质组学的研究方法利用家蚕卵色限性 品种(W二1)对催青后期胚胎和蚁蚕进行雌雄性别差异蛋白质的研究，找出性别生理 差异蛋白，结合家蚕数据库进行质谱鉴定，进一步发现性别会影响家蚕胚胎发育过程 中器官和组织蛋白质的合成，获得的主要结果如下： 1．W-1蚕卵不同发育阶段的形态图 用氢氧化钾脱壳法成功解剖了家蚕品种W-1雌雄卵各个时期的胚胎，采用倒置 显微镜拍摄了照片。为后续实验材料做了充分的前期准备。并且将雌雄胚胎分别解剖 出来。 2家蚕品种W-1己3期雌雄卵可溶性蛋白质表达谱的研究 2．1家蚕品种W-1己3期雌雄卵可溶性蛋白质双向电泳图谱的建立 用蛋白质双向电泳技术对己3期家蚕卵可溶性蛋白进行了蛋白质组分的比较分 析。结果显示：雄卵和雌卵分别检测到317和335个斑点，能互相匹配的蛋白点273 对。其中雄卵特异斑点44个，雌卵特异斑点62个。这些差异蛋白的出现，显示雌雄 蚕卵可溶性蛋白质组分存在差异。 2．2家蚕品种W-1己3雌雄卵可溶性蛋白表达谱差异蛋白的质谱鉴定 特征蛋白进行了基质辅助质量飞行时间质谱(MALDI．TOFMS)分析，已鉴定 的蛋白包括家蚕未知的角蛋白、原肌球蛋白同源体5、Sqd基因编码的RNA结合蛋 白、转胶蛋白、热激蛋白20．4、原肌球蛋白1和与果蝇同源的Tml蛋白。进一步说 明性别会影响胚胎器官和组织蛋白质的合成。 3家蚕品种W-1己4期雌雄卵蛋白质双向电泳图谱比较分析 中文摘要 家蚕卵色限性品种(W-I)蚕卵的发育后期及蚁蚕蛋白质组的研究 用蛋白质双向电泳技术对己4期家蚕卵蛋白进行了蛋白质组分的比较分析。结果 显示：雄性蚕卵蛋白样品中共检测到486个蛋白斑点，雌性蚕卵蛋白样品中共检测到 427个蛋白斑点，雌雄能匹配的蛋白斑点有380对，匹配率达到81．29％。其中雄性特 异蛋白斑点106个，占总蛋白斑点数的21．81％。而雌性特异蛋白斑点47个，占总蛋 白斑点数的11．01％。 4家蚕品种W-1己5期雌雄卯蛋白质双向电泳图谱比较分析 对胚胎己5期雌雄卵蛋白质用双向电泳的技术和方法进行蛋白组分的比较分析。 结果显示：雄性蚕卵蛋白样品中共检测到471个蛋白斑点，雌性蚕卵蛋白样品中共检 测到432个蛋白斑点，雌雄能匹配的蛋白斑点有395对，匹配率达到84．27％。其中 雄性特异蛋白斑点76个，而雌性特异蛋白斑点37个。 5家蚕卵色限性品种(W-1)雌雄蚁蚕蛋白质表达谱的研究 5．1家蚕品种W-I雌雄蚁蚕蛋白质双向电泳图谱的建立 应用双向电泳和图像分析技术，研究家蚕品种W-1雌雄蚁蚕的总蛋白的差异。 结果显示：雄蚁和雌蚁分别检测到478和444个蛋白点，能相互匹配的蛋白点为410 对，占88．57％，雄蚁特异斑点有68个，雌蚁有34个。这些差异蛋白的出现，显示 雌雄蚁蚕蛋白质组分存在差异。 5．2家蚕品种W-1雌雄卵蚁蚕表达谱差异蛋白的质谱鉴定 特征蛋白进行了基质辅助质量飞行时间质谱(MALDI．TOFMS)分析，已鉴定 肌球蛋白轻链2，推测的蛋白质和与果蝇同源的蛋白GMl7246。进一步说明性别会影 响胚胎器官和组织蛋白质的合成。 关键词：家蚕；W-1；己3；己4；己5；蚁蚕期；双向电泳 作 者：谢再东 指导老师：沈卫德 Ⅱ Proteomicson atlater andthe larvae color-limitedmori variety，