水稻Pip2-蛋白与水稻条纹病毒蛋白互作的研究.pdfVIP

DissertationforMaster INTERACTIONBETWEENRICEPROTEIN Pip2—2 ANDRICESTRIPEVIRUS—ENCODEDPROTEINS Xia Candidate：Danping Chen Jianping Supervisor：Professor AssociateProfessorFeiYan Discipline：Botany of Science． ChemistryLife College Normal 321004，Zhejiang ZhejiangUniversity,Jinhua 2014 May 万方数据 本研究得到浙江省自然科学基金和“现代农业生物技术与 作物病害防控——浙江省高校重中之重学科建设资金资助。 研究工作在浙江省农业科学院“浙江省植物有害生物防治 重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地”完成。 Thisworkwas NaturalScienceFoundationof supportedby Provinceand ect Constructionof Zhejiang KeySubj Program and DiseaseContr01． zhejiangagriculturalBiotechnologyCrop ThisWorkwasdoneinstate Base KeyLaboratoryBreeding for SustainablePestandDiseaseControl Zhejiang 万方数据 摘要 水稻条纹枯叶病是由水稻条纹病毒(ricevirus，RSV)所导致的一种在我国 stripe 及东亚稻区普遍流行的水稻病害，给粮食生产造成重大损失。病株表现的症状为植 株矮小，枯孕穗或穗小不结实，RSV主要由灰飞虱介导传播，为RNA病毒，其基因 组为四条单链RNA。 我们在研究过程中发现一个定位于核仁的蛋白与RSV蛋白存在互作。核仁是生 物体细胞内的重要结构，它的主要功能是转录rRNA及组装核糖体单位，同肘还参 与基因沉默，细胞衰老，细胞周期调控，或作为一种感受细胞外界变化的应力传感 器起到保护细胞的作用等。近十多年的研究发现，病毒在感染细胞过程中，有时可 与核仁及其所含因子如核仁素、核纤维蛋白或者B23蛋白相互作用，通过改变这些 蛋白的定位而影响核仁功能，导致病症的发生，或者利用核仁及其组分完成自身的 侵染。 本实验室在前期工作中，通过酵母双杂交技术筛选出了水稻中与RSVp2蛋白存 在互作的一个蛋白Pip2．2。进一步通过酵母双杂交技术及双分子荧光互补技术发现 Pip2．2除与RSVp2蛋白互作之外，也与pc2蛋白互作，并且发现它们发生互作的位 置位于细胞核内。为了检测Pip2．2蛋白定位，我们将其构建到融合绿色荧光表达