池蝶蚌性腺相关白及其理化性质研究.pdfVIP

摘要 摘要 关于双壳类软体动物生殖生物学的研究，国内外已有一些报道。目前，对 于性别、生殖的分子研究主要集中在人类和模式生物中，有关于水生生物这方 面的研究很少，并且有关池蝶蚌(Hyriopsisschlegeh)性腺发育与相关蛋白生物 学的内容还未见报道。作为淡水珍珠育珠的代表，池蝶蚌具有巨大经济价值， 研究其性腺发育与相关蛋白等内容可为池蝶蚌种质资源保护、优良品种培育、 人工繁育等提供理论参考和依据。 一 阻凝胶层析、蛋白透析等现代生物学技术对性腺变化形态学、性腺总蛋白种类、 雌雄性腺相关蛋白动态变化、雄性性腺相关蛋白的纯化及其部分性质进行了研 究，为进一步开展池蝶蚌生殖生物学研究提供依据。主要结果如下： 一、池蝶蚌性腺蛋白研究 分别采取石蜡切片和SDS．PAGE电泳对5龄池蝶蚌性腺组织学变化和性 腺总蛋白变化进行观察，分析性腺发育与蛋白动态变化的联系。池蝶蚌繁殖期 和非繁殖期性腺发生显著变化，并且雌性个体性腺蛋白水平在不同发育阶段呈 现明显变化。从非繁殖期向繁殖期的过渡中，雌性性腺相关蛋白的表达水平是 逐步提高的，并在繁殖期达到最高峰，之后表达量减少并维持在一定水平；雄 性性腺相关蛋白的表达水平也呈现周期变化，非繁殖期表达量最大，繁殖期表 达量最小。 二、池蝶蚌雄性性腺蛋白部分理化性质研究 采用蛋白透析法从成熟池蝶蚌雄性性腺中提取相关蛋白，并初步分析了其 量为16．02KDa、14．96KDa和13．41KDm样品缓冲液中13．巯基乙醇的有无 并不影响蛋白条带，推测其三条蛋白条带为三种不同蛋白。将纯化后的样品进 行Native．PAGE，电泳后的凝胶分别使用苏丹黑B进行脂蛋白特异性染色和罗 丹明B进行磷蛋白特异性染色，并采用考马斯亮蓝染色进行对比，结果显示凝 胶与这两种试剂均出现阴性反应，从而说明该三种蛋白不是一种富含脂、磷的 大分子蛋白。 关键词：池蝶蚌，性腺，蛋白，理化性质 Ⅱ Abstract ABSTRACT and ofbivalveareresearchedall Developmentalreproductivebiology deeply overthe to studiesare focuson withthehuman world．Upnow,many mainly dealing andbiomodel anumberofcritical involvedinsex organism，and genes differentiationand havebeenidentified．Butalittle reproduction availableand is valuablesexdifferentiationand informationshownin reproduction Hyriopsis akindof offreshwater schlegeli．Asrepresentativespecies pearlmussels，Hyriopsis have commercialvalues．Theresultsnot enrichbasic huge only schlegeli knowledge and