Ⅰ.酞菁化合物作为红区荧光试剂的应用的分析Ⅱ.快速荧光免疫研究法的分析.pdf

—-——————————————————-———_———__———————————————————————_————————————————一一 ———．——————————————!!i—j!：———————．———————．．———————．．—————．—．————．一 摘要 Y长波发射荧光试剂的合成与应用及快速荧光免疫分析新方法的研究是现代 荧光分析方法两个引人注目的领域0本论文选题于这两个研究方向，并开展相 关的研究工作。全文共分为两部分，即酞菁化合物作为红区荧光试剂的应用研 究及快速荧光免疫分析方法研孙供七章。 第一章首先介绍了红区及近红外荧光检测技术的应用进展。由于酞菁化合 物作为红区荧光试剂的研究构成了本文的主要部分，本章还对酞菁化合物的结 构、性质、制各和应用做了介绍。 aluminum 第二：章以自行制备的四磺基铝酞菁(tetra-substituedsulphonated 定中的应用及其与蛋白相互作用的研究。我们观察到，在酸度合适的介质(如 蛋白对此效应不产生干扰，据此现象建立了血清中自蛋白的选择性测定方法。 进一步的研究发现，球蛋白经变性后也可与AIS，Pc发生作用而使其荧光猝灭。 通过酸度控制的方法可实现血清中自、球蛋白质的连续测定。该方法仅需使用 一种试剂，且白、球蛋白无需分离，因而具有简便、快速的特点。本法对白蛋 白的检测限为40ng／mL，对球蛋白的检测限为70ng／mL。本章第四节将吖啶橙一 AIS．Pc的离子缔合物作用应用于核酸定量，建立了核酸测定的新方法，并探索 了其机理。浚方法具有试剂易得，重复性、准确性较好的特点。对会黄色葡萄 球菌核酸的测定表明了本法的饿实用性。由于阳离子缔合作用是一种普遍现象， 因此，我们认为本节所探讨的原理呵望推及其它阴、阳离子缔合作用体系。本 章第互节将荧光各向异性的原理应用于研究酸度对AIS。Pc与白蛋白相互作用的 影响，探讨了其规律性，并进行了有关计算。 第。i章主要对四羧基铝酞菁还对AIC．Pc作为pH测量的红区(吸收和发射) 试剂的可行性及机理进行了探讨。结果表明，AIC。Pc的吸收和发射特性随酸度 发牛舰律‘盹变化的原因，是由于介质酸度的变化导致了AIC。Pc酸、碱式型体的 变化从f而引起体系中AIC。Pc单体与二聚体离解平衡的移动所致。 确 整 讯pU学的I：作F，，分为曲部分。首先对自行制备的四氨基铝酞菁(tetra． substitutedaluminum amino 探针的可行性进行了考察，并探讨了其机理。TAAIPc在pH2．0时不发荧光， 咖佧性酸性介质中可发射红色荧光(kern=678nm)，且其相对荧光强度随体系 tll强酸含量的增加而呈对数增长关系。掘此原理，建立了以TAAIPc为红区荧 光探针的强酸测定方法，并应刖j二HCI、HBr、HNO，和H，SO，的测定，结果令 人满：誊。其次，我们对TAAIPc作为红区荧光探针应用于胆红素测定的可行性 进行了}／J步探讨。TAAIPc经莺氯化后，可与胆红素反应形成荧光产物。且其相 对荧光强度与胆红素量呈对数相关关系。 第ti章对均相荧光免疫分析的原理、技术和新进展进行了综述。 第六章的工作可分为两部分。第一部分将荧光各向异性的原理应用于荧光 标记物对蛋白质标记比的测定。1j传统方法相比，本法具有简便、快速、准确 的特点。另外，由于模型体系中的蛋白质和荧光标记物是任意选定的。因此， 本法具有通用性。其对其它蛋白(乃至核酸)一荧光标记物体系也应是适用的。 第：部分的工作是将红区荧光标记物四羧基铝酞菁、热敏相分离技术和自行设 汁的新型荧光液池(及池架)相结合，建立了一种快速荧光免疫分析新方法。 该法仪需‘步离心分离即可实现对分析对象(如抗原)的带管直接检测。操作 简便、快速，是一种很接近均相检测的荧光免疫分析新方法。浚法已成功地应 用f乙型肝炎表面抗原的测定。 第七章对本论文所设计制作的、用于荧光分光光度计和分光光度计的新型 液池架作了介绍。这三种液池架可容纳生命科学研究中常用的塑料离心管，解 决了塑料离心管与普通荧光分光计和分光光度计的兼容问题，具有广泛的应用 前景。I型和II型荧光液池架已成功地应用