TCB4-1细胞培养技术+2.pdf

第四章 细胞培养技术 1 Outline 1. Animal cell culture 2. Human cell culture 3. Stem cell culture 4. Tumor cell culture 2 Deng XB, et al., Apoptosis. 20114 3 Animal cell culture • Primary culture Sensitive Complex • Cell line ATCC (American Type Culture Collection) 4 动物原代细胞培养技术 • 动物细胞与组织培养 是从动物体内取出细 胞或者组织，模拟体 内的生理环境，在无 菌、适温和丰富的营 养条件下，使离体细 胞或者组织生存、生 长并维持结构和功能 的一门技术。 5 6 Wang JT, et al., Nanoscale Res Lett. 2014 每代贴附生长细胞的生长过程 •游离期 •贴壁期 •潜伏期 •对数生长期 •停止期（平台期） 7 8 游离期： 细胞接种后在培养液中呈悬浮状态，也 称悬浮期。此时细胞质回缩，胞体呈圆 球形。 9 10 贴壁期： • 细胞附着于底物上，游离期结束。细胞株平 均在10 min－4 h贴壁。 底物：胶原、玻璃、塑料、其他细胞等。 • 血清中有促使细胞贴壁的冷析球蛋白和纤粘 素、胶原等糖蛋白（生长基质），这些带正 电荷的糖蛋白的促贴壁因子先吸附于底物上， 悬浮细胞再与吸附有促贴壁因子的附着。 • 进口塑料培养瓶涂有生长基质 （化学合成的 功能基团）。 11 12 潜伏期： 此时细胞有生长话动，而无细胞分裂。细 胞株潜伏期一般为6～24小时。 对数生长期： 细胞数随时间变化成倍增长，活力最佳， 最适合进行实验研究。 停止期（平台期）： 细胞长满瓶壁后，细胞虽有活力但不再分 裂。机制：接触抑制、密度依赖性。 13 倒置显微镜