药物小分子与牛血清白蛋白的光谱法与研究.pdfVIP

摘要 摘 要 本论文分别采用紫外．可见吸收光谱、荧光光谱为研究手段，研究了几种有机小分子与牛血清白 SelqJm 蛋I兰l(bovine 血清白蛋白相互作用的研究现状及意义；二、在模拟人体生理条件下研究了几种有机小分子与BSA 相互作用的光谱信息，并结合化学计量学对其数据进行解析。光谱法在小分子与生物大分子相互作 用的研究领域的应用日益广泛，但是光谱法结合化学计量学来探讨小分子与血清白蛋白的结合作用 的文章还比较少。本论文尝试将多种化学计量学方法用于解析实验得到的光谱数据，讨论了方法的 原理和实际应用，并探i,ltT化学计量学在复杂的生物化学体系中实现同时解析多组分平衡浓度和纯 光谱的可行性。 论文第一部分首先简要的介绍了蛋白质的定义、结构、功能和性质等，然后依次对小分子与血 清白蛋白相互作用的研究方法、研究内容和存在的问题等方面展开了评述，探讨了化学计量学在小 分子与血清白蛋白相互作用研究中的应用。最后还展望Td,分子与血清白蛋白相互作用研究的发展 趋势，将新探针的开发、各种仪器方法的联用及化学计量学方法的引入作为研究重点。 把所测得的混合物的一系列光谱数据用化学计量学方法一多元曲线解析．交替最小二乘法fMCR．ALS) 来解析，得到混合物中纯物质光谱图和浓度图，这是一般方法所得不到的信息。而且，体系中生成 L 并且形成了APT-BSA复合物。本文还计算出反应的结合常数(如棚)=2．34x106mol。)、结合位点数 力学参数进行比较，结果表明焓变随分予结构的变化影响不大，此为熵驱动反应。BSA与APT相互 竞争结合实验说明APT在BSA上的结合位点是在I位。 强。同步荧光光谱和三维荧光光谱是用于研究BSA构象变化较好的方法，实验发现BDF的加入很 明显的改变了BSA的空间构象，使得BSA分子中色氨酸残基的极性增加，疏水性下降，而BDF的 加入并不会导致BSA分子中酪氨酸残基周围的环境发生变化。曙红Y是一种新的I位探针，本文利 ll 摘要 而是发生竞争作用，曙红Y把BDF竞争来。 catabolite， 发生了静态猝灭作用产生了复合物。同时用三维荧光光谱和同步荧光光谱法探讨了CF及CFP对BSA 构象的影响，为预防和医治CF及CFP中毒提供了重要的依据。最后本文还研究了金属离子对它们 之间作用的影响。 O．羟基喜树 论文第五部分在生理pH条件下用荧光光谱法和紫外光谱法结合化学计量学来研究1 法林作为标记药物，采用三维荧光技术，分别对竞争实验过程进行扫描，进而用平行因子法(PARAFAC) 处理所得三维数据，并根据蛋白质结合位上药物的置换作用确定了10-HCPT的结合位置是BSA的 site 构象发生变化，BSA内部氨基酸残基所处环境的疏水性下降。 关键词：牛血清白蛋白；有机小分子；荧光光谱；紫外．可见光谱；化学计量学 IIl ABATRACT ABSTRACT moleculeswithProteinwasstudied Thereactionmechanismofsmall fluorescence by of and interactionseveral moleculeswithbovineserum UV organic