胰岛素、睾酮、AngⅡ、Ang-(1-7)对体外培养子宫内膜细胞的血管紧张素受体细胞发育影响.pdfVIP

IIIIIII11Ill II 111111Irl l lllI Y2336732 目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………4 研究论文胰岛素、睾酮、AngII、Ang一(卜7)对体外培养子宫内膜细胞血 管紧张素受体及细胞发育的影响 前言……………………………………………………………………………………………．．8刚看……………………………………………………………………………………………．．毽 材料与方法………………………………………………………………9 结果……………………………………………………………………………………………19 附图……………………………………………………………………．23 附表…………………………………………………………………………．．28 讨论……………………………………………………………………………………………30 结论…………………………………………………………………………………………．33 参考文献………………………………………………………………．34 综述 子宫内膜不典型增生和早期子宫内膜癌的保守治疗……………．．38 致谢……………………………………………………………………………54 个人简历……………………………………………………………………．55 中文摘要 胰岛素、睾酮、Ang 管紧张素受体及细胞发育的影响 摘 要 目的：原代分离及培养在位人体子宫内膜腺上皮及间质细胞，建立正 常子宫内膜的体外模型。通过检测胰岛素和睾酮作用于子宫内膜细胞后血 管紧张素受体的变化，以及AngII和Ang．(1．7)作用于子宫内膜细胞后细 子宫内膜发育的关系，以期为PCOS患者子宫内膜病理改变以及治疗提供 新思路。 方法： 1通过酶消化、二次滤网过滤、差时贴壁等方法对30例正常在位子 宫内膜组织进行分离培养，免疫细胞化学法鉴定细胞纯度，染色观察细胞 形态，显微镜观察细胞生长状态及生长环境。 殖期子宫内膜间质细胞生长的影响，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 测定INS、T对增殖期及分泌期子宫内膜间质细胞和腺上皮血管紧张素II (AnglI)的1型受体(ATlR)、2型受体(AT2R)、血管紧张素1．7 (Ang．(1．7))的受体(MAS)mRNA的表达的影响。 II、Ang-(1．7)分别作用于相 3予10。12mol／L～10巧mol／L浓度的Ang 同生长期的增殖期与分泌期子宫内膜间质细胞与腺上皮24、48及72小 Ang 对于细胞增殖与凋亡的影响。 结果： l原代子宫内膜细胞培养成功率为97％。间质细胞纯度为95％，有 限传代，可存活一月。腺上皮纯度为90％，不易传代，可存活10天，传 代时间短时，姬姆染色较HE染色效果要好。间质细胞随时间增殖，48 中文摘要 小时增殖最快，增殖期细胞较分泌期细胞增长快。腺上皮24、48、72 小时细胞数无明显变化。 2胰岛素和睾酮刺激子宫内膜细胞后的变化 2．1MTT法检测子宫内膜细胞的增殖，OD值显示： 生理剂量，高剂量的INS均可促进增殖期间质细胞增殖，随胰岛素浓 度的增加，胰岛素促进细胞生长的作用增强，与对照组相比均有显著性差 异(氏O．05)，且具有时间依赖性，48／J,时最强。不同浓度的睾酮均可抑 制增殖期间质细胞生长，与对照组相比均有显著性差异(火O．05)，且具 有时间依赖性，48d,时抑制作用最强。 2．2子宫内膜上AT】R、AT2R、MASmRNA的表达 于间质细胞(氏O．01)，分泌期与增殖期表达差异无统计学意义(胗O．05)。 相比差异无统计学意义(胗O．05)，而高剂量INS、T刺激后各期腺上皮