《荧光假单胞菌脂肪酶（PFL）的固定化及催化合成乙酸肉桂酯2016年论文》.pdfVIP

中国食品添加剂 ChinaFoodAddi 开 发 应 用 荧光假单胞菌脂肪酶 (PFL)的固定化及催化合成 乙酸肉桂酯 刘昱杉，胡兴超，丛方地 ，王岁迪，王彦玲，王双双，邢克智 ， 关欣 ，吕欣 ，赵赛 ，张莹，王笑，周 美娟 (天津农学院基础科学学院生物制药系，天津 300384) 摘 要 ：为提高酶促合成食品添加剂乙酸肉桂酯的效果，选用荧光假单胞脂肪酶 (PFL)为生物催化剂， 肉桂醇为底物，乙酸乙烯酯为酰化试剂和溶剂，研究了PFL在反应器内壁上的固定化、及其催化转酯反应合成 乙酸肉桂酯的动力学。结果表明，相对于塑料 (PMMA和PET)，在玻璃壁上的固定化PFL，吸附牢固，活性 高。酶的固定化中，水可以明显优化PFL，但是不能稳定PFL；如果添加亲水性大分子羧甲基纤维素 (CMC)， 则可以更好地稳定PFL。催化转酯 18h，在玻璃壁上的CMC一固定化PFL可转化底物 99％，再次使用时仍可 转化 83％的底物 ；而水一固定化PFL可转化底物98％，但再次使用时仅转化底物76％；酶粉转化底物86％， 再次使用时转化底物62％。可见，在玻璃载体上的CMC一固定化PFL可更有效地催化合成乙酸肉桂酯。 关键词：乙酸肉桂酯；荧光假单胞菌脂肪酶；酶固定化；酶活性 ；酶稳定性 中图分类号：TQ925+．6，TQ202．1 文献标识码：A 文章编号：1006—2513 (2015)06—0140—05 Immobilizationofpseudomonasfluorescenslipase(PFL)andits catalysisinsynthesisofcinnamylacetate LIU Yu-shan，HU Xing-chao，CONG Fang-di，WANG Sui-di，W AND Yan·ling， W ANG Shuang-shuang，XING Ke-zhi，GUAN-Xin，LV Xin，ZHAO Sai，ZHANG Ying， WANGXiao，ZHOUMei-juan (Tianjinkeylabofaquaticecologyandaquaculture，departmentofbiopharmaceuticals，CollegeofBasic Sciences，TianjinAgriculturalUniversity，Tianjin 300384) Abstract：Forenhancingtheenzyme—catalyzedeffectinsynthesisofcinnamylacetate，Pseudomonasfluorescens Iipase(PFL)wasemployedasbiocatalystusedinreactionsystemconstitutedbycinnamylalcoholassubstrateand vinylacetateasacylationreagentandsolvent．tostudytheimmobilizationofPFLontheinnerwallofreactorsand hteenzymekineticsinsynthesisofcinnamylacetateviacmalyzingtransesterificationofcinnamylalcoholwithvinyl acetate．TheresultsshowedthatPFLadsorbedfirmlyonglasswallratherthanonplastic(PMMAandPET)wal1and alsotheformerbehavedanactivityobviouslyhigherthanthelatter．Watercouldnicelyoptimizebutineptlystabilize PFLunlesshydrophilicmacromolecularcarboxymethylcellulose(CMC)importedin．After18h，onglasswall CM C—immobilizedPF