以假病毒为基础的HIV1中和抗体检测体系的建立以及初步应用.pdfVIP

生坐筮生堑堂塑量瘥堂塞盍垫堡生』旦筮垫鲞筮§翅g堕垫』丛旦丝型墅!!坚趔，!!盟塑!：!堕：垫，№：! ．免疫检测- 以假病毒为基础的HIV一1中和抗体 检测体系的建立以及初步应用 种辉辉 洪坤学 张春涛 聂建辉 孔维 王佑春 【摘要】 目的建立以假病毒为基础的HⅣ-l中和抗体检测方法，并对其进行初步应用。方 法从重组质粒中扩增出gpl60基因片段，并克隆到pcDNA3．1质粒上，酶切鉴定得到阳性克隆。将 阳性克隆分别和psG3△e聊质粒共转染获得假病毒。用假病毒分别检测单克隆抗体和HIV-1抗体阳 性血清的中和活性。结果成功地获得了4株假病毒cHB0l、cHB02、cHBC03和cHAE04。单克隆 抗体4ElO可以中和4株假病毒；单克隆抗体2F5不能中和cHBc03假病毒株，但可以中和cHB0l、 不能中和cHAE04假病毒株。43份HIV—l抗体阳性血清中针对不同假病毒的中和抗体明显不同。 结论所获得的假病毒可以用于中和抗体的检测，但不同假病毒株的中和特性不同。 【关键词】HIV-1；中和抗体；假病毒 Es纽bUs岫entaⅡd I．orlⅡV·lC肋，VG p—maryapp脏∞廿加of雕蝌瞰Iovin塔．basedneutraliza廿on嘲y you—c^吼． 磊ki一『l￡‘i’，肋，vG^“．并耻，Z黝^rGC^￡正n一^∞，』、r膪．，缸n一^ui，肋，vG耽i，黝^『G ’cD抛酽旷 跏sc拓眦e．以丘凡c，砌e巧计，C胁懈危肌J?∞舵，吼iM c口胛卵栅嘶删枷：张们yoM一如∽，№如删凰m山e加如Cbmrof矿肌m础m幻口f删日如嘶耐 md∽拈．讲昭，O伽。傩i舳．西M口：鲫m“订@似kD．com T0establisha 【Abstmn】Obj删ve pseudo“兀膪．b船edneu仃ali嬲tion船say．Metho凼111e were fmm HIV—l were into ‰ctioTlal印160genes ampIjfiedpl∞midscontaininggene．rnlepmductslig鹊ed and cloneswerescreened restriction pcDNA3．1pl聃midpositive bydigestion而thenzymes．rI’hepseudovir． uBeBwereharvestedco．tran8fectionofthe cloneand acti“- by posi“ve pSC3△e，Ⅲpla8mid．TheneutraJizjng tiesofmonoclonal舳tibodieBandHIV．1 wereme踮uredt}le8e antibodyp∞itivepl鹊m by pseudoviruse8． of and been 黜slIIts1hefourstrains CHAE04)had psedoviruses(CHB0l。CHB02，CHBc03 successfully obtained．Monoclonal4ElOcouldneutralizeallof4 while2G12couldnotneutralize antihody pseudovimses 2F5c叫Idneu仃alize andCHAE04but 帅vpesudoviru∞s．M0noclonalantibodv pseudovirusCHB01，CHB02 not