右旋糖酐酶产生的筛选、鉴定及酶学性质研究.pdf

第 1 页 摘要 目录 摘要4 Abstract 6 第一章 研究概况9 1. 右旋糖酐的研究概况9 1.1 右旋糖酐的结构和理化性质9 1.2 右旋糖酐的应用10 2. 右旋糖酐酶的研究概况 11 2.1 右旋糖酐酶的定义及分类11 2.2 右旋糖酐酶的来源11 2.3 右旋糖酐酶的性质和结构12 2.4 右旋糖酐酶的基因和一级结构16 2.5 右旋糖酐酶的应用19 3. 课题研究背景和内容 20 第二章 右旋糖酐酶产生菌株的筛选22 1. 材料、仪器与试剂 22 1.1 材料22 1.2 主要仪器22 1.3 试剂及其配制22 2. 实验方法23 2.1 培养基的配制23 2.2 菌株的分离筛选24 2.3 培养性状24 2.4 透明圈的比较25 2.5 发酵液酶活测定25 3. 结果与分析25 3.1 菌株的分离筛选25 3.2 培养性状27 3.3 透明圈的比较29 3.4 发酵液酶活30 4. 讨论31 第三章 右旋糖酐酶产生菌的分类鉴定32 1. 材料、仪器与试剂 32 2. 实验方法32 2.1 培养基的配制32 2.2 培养性状33 2.3 基因组提取33 2.4 ITS rDNA扩增34 2.5 感受态细胞制备35 2.6 连接和转化36 第 2 页 右旋糖酐酶产生菌株的筛选、鉴定及酶学性质研究 2.7 检测37 2.8 测序37 2.9 数据处理37 3. 结果38 3.1 D4 菌分类鉴定38 3.2 D5 菌分类鉴定42 4. 讨论46 第四章 右旋糖酐酶酶学性质49 1.材料、仪器与试剂49 2. 实验方法49 3. 结果50 3.1 D4 菌Dex酶学性质研究 50 3.2 D5 菌Dex酶学性质研究 54 4. 讨论57 第五章 右旋糖酐酶产生菌的产酶发酵研究59 1 材料、仪器与试剂 59 1.1 供试菌株59 1.2 主要仪器59 1.3 主要试剂及其配制59 2 实验方法59 2.1 培养方法59 2.2 酶活力测定59 2.3 生物量测定60 2.4 碳源的影响60