鸡粪抑氨菌的分、鉴定及其制剂的研究.pdfVIP

伽Ⅲ㈣㈣删洲删哪删舢l Y2149604 摘要 随着我国蛋鸡养殖业规模化和集约化程度的快速提高，蛋鸡生产过程中所产生的 氨等恶臭气体对鸡体健康和环境的影响也日趋严重。氨具有刺激性气味、高浓度时会 强烈刺激动物的呼吸道黏膜、眼结膜和眼角膜，损伤动物的呼吸系统和眼睛，甚至影 响消化系统、免疫系统和神经系统，从而导致畜禽生产性能下降，给养殖业造成很大 的经济损失。如何有效控制鸡舍内氨的浓度，减少其对蛋鸡生产和环境的危害，已经 引起业界的高度重视，人们开始尝试各种控制氨气浓度的方法。利用微生物抑制鸡粪 中氨释放是目前发展起来的廉价而有效的氨气控制方法，倍受业界关注。为此，本研 究从不同环境分离源中分离到两株抑氨菌株，通过形态学、分子生物学、生理生化鉴 定和16 S】．DNA系统发育分析，确定其分类学地位，并进行抑氨作用和抑氨菌固态制 剂的研究。 1．鸡粪和土壤中抑氨菌的分离纯化及鉴定。为了获得对鸡粪有抑氨效果的抑氨 菌并确定菌株的分类地位，分别以鸡粪和土壤为分离源，用含氨富集培养液对抑氨菌 进行了富集培养，以筛选培养基平板进行了分离纯化，并甲醛法以进行了初筛，以三 角瓶内的抑氨试验进行了复筛，并对其进行了形态学观察、分子生物学和生理生化鉴 定。结果表明，分别从鸡粪和土壤中获得的菌株J16和T26，都具有高效的抑氨作用， 乳酸片球菌(n旃Dcocc淞口c溉肠c咖f)和枯草芽孢杆菌(肋cfZks“搬啦)的同源性 口cf破肠c晓i)B3菌和枯草芽孢杆菌(B口ci盯嬲J都6疗凰)A3菌。 2．抑氨菌的抑氨作用研究。鸡粪中最主要的含氮物质尿酸能分解为尿囊素和尿 素等化合物，为了研究枯草芽孢杆菌A3菌的抑氨作用，以含尿酸培养基对鸡粪中的 产氨菌进行富集、分离，以尿酸、尿囊素和尿素分别作唯一氮源的培养基检测产氨菌 以这3种含氮物质作氮源的生长情况，以纸片法在产氨菌富集培养基平板上测定枯草 芽孢杆菌A3菌对产氨菌的抑菌圈大小。结果表明，分离到的19株产氨菌中，全部 都能在尿酸培养基上生长，17株能在尿囊素培养基上生长，18株能在尿素培养基上 生长，枯草芽孢杆菌A3菌对17株产氨茵有明显的抑制生长的作用。根据结果推测， 绝大多数产氨菌能利用不同的含氮物质产生氨气，枯草芽孢杆菌A3菌能通过抑制产 氨菌的生长达到抑制鸡粪氨释放的目的。 3．抑氨菌固态制剂的研究。为了将枯草芽孢杆菌A3菌和乳酸片球菌B3菌制成 抑氨菌固态制剂并研究其抑氨效果，以麦麸、麦秸、麦糠、稻草、稻壳、玉米芯和锯 末为载体物质，经粉碎干燥后通过组合得到63种组合载体，测定各组合载体的吸水 率后，吸收混合菌液制成抑氨茵固态制剂，经过3天的抑氨效果测定后，选择抑氨效 果最佳的固态制剂，研究了其载体吸收氨和菌体、菌剂抑氨的效果。结果表明，由等 量麦糠、稻壳和玉米芯混合载体吸收200％(v／w)混合菌液后制成的固态制剂抑氨效 果最佳为82．5％，明显高于混合菌液的抑氨效果72．09％。固态制剂由载体和菌体两 部分组成，固态制剂的抑氨效果是载体吸收氨和菌体抑氨共同作用的结果。 关键词：鸡粪，抑氨菌，鉴定，作用 II Abstract inthe of hensis AmmoIlia瓶d硎1ermalodorous processlaying becoming gasesgenerated mores甜ous ontlleenviromenta11dbirds’he胡也埘th aIldintensiVe impact l鹕e-scale le、∞lsof hens’increased h嬲a feeding plmgemodor．Hi班