麻蝇全蛋白提取凝集素的纯化鉴定.pdfVIP

，抽专 摘 要 麻蝇是一种开发利用价值极高的昆虫生物资源，它不仅是一种很有前途 的廉价、优质动物蛋白源，而且经深加后可获得多种有效成分，具有较大的发展 潜力，可开发成医药、保健品、生化制剂及化工产品，并应用于癌症、艾滋病等 难治病的治疗，是近年来研究的一个热点和亮点。 本论文对麻蝇全蛋白提取和凝集素纯化鉴定进行了系统研究，得到较完整 的全蛋白提取物及高纯度凝集素单一蛋白；并对麻蝇全蛋白电泳图谱、凝集素进 行了初步分析。 实验目的：建立麻蝇全蛋白质的提取方法和合理的提取方案，获得麻蝇全蛋 白纯品，为制作麻蝇全蛋白电泳图谱创造条件，为麻蝇蛋白质组学研究积累基础 l- 数据。进行麻蝇凝集素的纯化与鉴定研究，获得高纯度麻蝇凝集素，为综合开 f 发和利用麻蝇资源打下基础，为其它昆虫蛋白资源的开发利用建立可资借鉴的方 ， l 案。 实验方法：在预备试验的基础上，根据麻蝇蛋白的组成特点，分别用盐溶、 醇溶、碱提等方法从脱脂麻蝇粉中分离提取清蛋白、小分子肽、球蛋白、醇溶蛋 白和碱溶性蛋白等几类蛋白，并测定蛋白质含量，采用正交实验等技术，优化提 取条件，设计麻蝇全蛋白提取方案，获得纯度较高的麻蝇全蛋白，用于制作麻蝇 全蛋白电泳图谱。采用亲和层析法和戊二醛法纯化凝集素，通过SDS—PAGE凝胶 电泳鉴定与分析了凝集素的理化性质与生物活性。 实验结果：脱脂麻蝇粉蛋白质的主要成分是清蛋白、球蛋白和小分子肽；大 部分蛋白质的分子量分部在32—86．2KD之间：蛋白质得率为44．94％，回收率为 85．6％，Tris一饱和酚法获得的麻蝇全蛋白电泳图谱较为理想。亲和层析法所获凝 集素的效价为256；麻蝇凝集素的相对分子质量为82．9KD。 关键词麻蝇；全蛋白；凝集素；纯化；鉴定 - 、 ● q 譬 Abstract ’ isa虹11dof resourcesthatithas for value Sarcophagaperegrina biological high and utilization．itisnot a development onlyverypromisinglow—cost,highquality animal SOurCe．butalsocanbeobtainedeffective after protein ingredients deep have tobe into care greaterpotential medicine，health processing，which