鹰嘴豆lateelongated hypocotyl(lhy)基因的克隆、序列分析及原核重组体构建.pdfVIP

本文是新疆农业大学校前期资助课题 “几种早春植物节律钟基因CIR的克隆及表达分析，， 的相关研究成果 (项目编号：XJAU201018) 课题主持人：夏木斯亚·卡坎 (新疆农业大学) 万方数据 ELONGATED 鹰嘴豆生物节律钟基因LATE 的cDNA全长克隆、序列分析及原核重组体构建 摘要 ELONGATEDHYPOCOTYL 本研究是从新疆的一种经济作物鹰嘴豆中克隆生物节律钟LATE 伍删的cDNA全长序列，进行序列信息学分析，研究其RNA的相对表达量以及原核表达载体构建。 对该基因的研究有助于探索光周期途径鹰嘴豆成花的分子调控机制。可作为鹰嘴豆花期调控分子育 种的目标基因。 鹰嘴豆生物节律钟基因LHY的eDNA全长序列，其核苷酸序列长度为3061 bp，包括2220bp的完 序列和验证所得的序列，二者一致，说明得到鹰嘴豆LHY基因，命名为CicerarietinumLinn．LHY基 因，将该基因序列提交到GenBank数据库中，获得基因登录号为KJ558378。 (2)应用生物信息学软件，对获得的鹰嘴豆LHY基因的核苷酸序列及编码的蛋白质序列进行 对CiLHY三级结构建模预测表明，蛋白质核心结构符合转录因子与DNA结合常见的功能域HTH。 的相对定量表达分析。结果表明，鹰嘴豆CiLHY的表达呈昼夜节律表达模式：不同光周期环境处理 下，CiLHY的表达量变化幅度很大。在光照处理0h，CiLHY的表达水平为最高，之后的表达量开始 降低，直到降到最低值即光照时间为16h：到24h，又发现CiLHY的表达量水平又升到最高。而表 达量水平的最高和最低值相差将近167倍。 进行酶切的原核表达载体PET-28a，成功构建了生物节律钟基因CiLHY的原核表达载体 。 PET-28a-CiLHY。 关键词：光周期环境处理：鹰嘴豆；LHY基因；生物信息学分析：基因表达 万方数据 and ConstructedrecombinantofLATE Analysisand Cloning ELoNGATEDHYPocoTYL(LHY、)GenefromCicerarietinumL。 Abstract The cDNA ofCicerarietinum isaneconomicin full—lengthsequence Linn．(cicer)that cropXinJiang that clock LATEELONGATED cloned，andthebioinformaticsof biothythmgene HYPOCOTYL(LHY)was the andrelative ofRNAwere 以陋 ELONGATED sequence expression analyzed．and vectorwasconstructed．Furtherresearchonthe will HYPOCOTYL(LHY)geneprokaryoticexpression gene themolecularcontrolmechaismoftheflowerofCicer