血管、神经组织工程.pptVIP

组织工程化组织的临床应用技术 组织工程教研室 苏曼曼 （三）生物可吸收材料血管移植物的应用： 不余留可能残余细菌孳生的材料、降低感染 不余留长期异物炎症反应的材料； 减少内膜过度增厚、减少血管阻塞 建立完整、有效、有力的组织结构： 1、可吸收材料中混合使用非可吸收材料 2、使用两种或两种以上的不同组织降解率的可吸收材料 3、应用生长和趋化因子，加强组织向内生长，加强加快 细胞整合到移植体上 五、血管组织工程： （一）体外血管组织工程：周期长 胶原支架—内皮细胞－平滑肌细胞－成纤维细胞 （二）体内血管组织工程： 1、无细胞管状基质+bFGF 2、小肠黏膜下层（SIS）血管替代品 3、小肠胶原层（ICL）血管替代品 （一）周围神经损伤后的病理生理改变： 远侧断端：Wallerian变性。轴突降解，髓鞘溃变、裂解，巨噬细胞吞噬溃变髓鞘，雪旺细胞分裂、增殖 近侧断端：轴浆运输继续进行，近端肿胀和回缩，轴膜封闭断端，更多细胞器聚集形成回缩球 神经元：（轴突反应：神经元胞体肿胀，尼氏体融解或消失，神经元死亡。 ） 反应程度与受损轴突的部位与胞体之间的距离和损伤程度相关。 （二）神经纤维的再生： 1、终末再生 损伤近断端轴突回缩，逐渐肿胀。几天后开始活跃增长出现生长椎。生长椎发出细小轴丝，在各个方向向外生长。 损伤远断端wallerian变性，轴突降解，髓鞘崩溃，雪旺细胞增殖（正常4－17倍），形成Bungner带。 Bungner带：雪旺细胞沿基底膜纵向排列，相互结合－有序的、柱状排列结构 2、侧支再生： 邻近未损伤轴突受雪旺细胞分泌因子及相应微环境诱导，生长出新的轴突侧支新芽 伸入Bungner带生长延伸到达效应器官 （三）神经元的保护与神经再生： 神经营养因子（NGF、bFGF） ECM成分（层粘连蛋白LN）、雪旺细胞 NGF：促神经细胞存活率增高 促神经细胞伸出的突起延伸 体外培养的神经元，诱导突起向NGF浓度高的 地方生长，决定神经纤维生长方向——趋化性 三、雪旺细胞在神经再生中的作用 1、雪旺细胞对神经元的保护作用： 分泌神经营养物质和ECM 2、神经损伤后雪旺细胞的变化： 溃变轴突、髓鞘刺激雪旺细胞分裂、增殖形成Bungner带 再生轴突刺激雪旺细胞分裂、增殖 3、雪旺细胞的营养作用： 分泌NGF、FGF等多种神经营养因子 四、神经损伤的修复： （一）直接缝合：外膜缝合、束膜缝合 不能直接缝合：神经回缩、神经缺损、 直接缝合后存在张力 （二）自体神经移植： 皮神经：有足够的长度和外径 解剖部位恒定且表浅易于寻找 切取后供区感觉障碍较少 缺损多少、受区组织条件影响移植效果 （三）同种异体神经移植：缺损过长或粗大神经缺损 液氮低温冷冻 降低抗原性 （四）自身非神经材料：动脉、静脉、筋膜、骨骼肌 （五）人工合成材料：硅胶管、PGA、胶原、PLA 五、组织工程方法修复神经损伤 （一）导管和支架的研究： 1、操作简单； 2、无张力或张力小 3、防止瘢痕生成； 4、对轴突生长起导向作用 5、使内源性神经活性物质聚集， 同时排除外源性抑制分子 聚乙烯、丙烯酸共聚物、胶原、硅胶管 层粘连蛋白和黏多糖 （二）细胞外基质的应用： ECM类似物： 细胞－细胞间的连接；细胞分化的导向作用 分子量小的、可溶性的、生物活性成分 （三）种子细胞与移植 雪旺细胞培养： 1）植块反复接种法： 种植块必须紧贴到培养器上，不能悬浮 可获得大量纯净的雪旺细胞而不用细胞毒性药物 周期长 2）酶消化法： 0.25%胰蛋白酶＋0.03%胶原酶分次消化 培养：20％小牛血清DMEM——24h加入阿糖胞苷 ——24h换为正常培养液——24h加入阿糖胞苷 ——24h改为正常培养液 操作简单，周期短；应用细胞毒性药物，雪旺细胞纯度稍低 3、差速贴壁法：预涂多聚赖氨酸，30－60分钟 六、周围神经组织工程展望 1、雪旺细胞： 培养永生化SC 基因工程技术修饰SC，保留应有的功能 2、支架材料：半透膜、中空纤维