消旋3-正丁苯酞对放射性脑损伤大鼠学习记忆能力及其海马MMP-9表达的影响.pdfVIP

消旋3．正丁苯酞对放射性脑损伤大鼠学习记忆能力及海马 MMP．9表达的影响 研究生：张谦 专业：神经病学 导师：刘运林教授 中文摘要 放射性脑损伤(ra【diationofbra证；ⅪB)是神经系统肿瘤和颈区肿瘤放射 i琦uries 治疗后的严重并发症，由于其部位的限制，手术切除或化学治疗的效果往往不明显， 放射治疗有效，且在某些肿瘤可能是唯一的治疗手段。尤其是随着近年来颅面颈区肿 瘤发病率的不断增加，肿瘤病人生命时间的不断延长，病人接受放射治疗的次数逐渐 增多，从而增加了放射性脑损伤的发病率。目前临床上对ⅪB的治疗以应用激素及 脱水剂对症支持治疗为主，治疗效果欠佳，因此，寻找有效的治疗药物是十分必要的。 我们在以往的研究过程中，建立了放射性脑损伤的大鼠动物模型，观察出放射性脑损 伤后可引起大鼠的学习记忆能力下降。本课题采用ⅪB大鼠作为模型，通过对经过 丁苯酞治疗过的耐B大鼠其行为学及海马病理学表现与未经治疗融B大鼠做比较， 为解释丁苯酞治疗ⅪB的机制提供指导。 学习与记忆都是大脑较为复杂的高级智能活动，学习是经验和技能的模仿与获 得，记忆则是经验和技能的总结与积累。学习与记忆是两个不同的神经生物过程，只 有两者紧密联系、密切配合，才能使人体完成一系列复杂的大脑活动。记忆可分为瞬 时记忆、短时记忆、长时记忆和永久记忆。已有大量研究表明，海马结构广泛参与学 习记忆能力，尤其短时记忆和近期记忆【l】，在研究中，人们发现cA3区与空问辨别 性学习记忆活动的关系尤为密切【2】，从解剖学上来看，长时记忆与海马突触形态、功 能以及突触联系的建立、突触的可塑性变化具有密切的联系。学习记忆与海马内胆碱 能、单胺能系统、氨基酸能系统具有密切的联系。因此，我们在本次实验中选用大鼠 的海马区域进行组织病理学研究。 效成分与从芹菜籽中提取的左旋芹菜甲素结构相同，中国医学科学院与中国协和医科 大学药物研究所联合开发出其异构体右旋丁基苯酞并将它们合成人工消旋体，成为一 类国家级新药网，该药物可明显缩小脑缺血区的卒中面积，抗脑血栓形成、抗血小板 聚集，改善脑循环，促进脑代谢，减轻脑水肿，抑制神经细胞凋亡等。对该药的研究 目前多因为其较好的改善脑缺血患者的预后，其机制可能主要通过减少脑组织和血管 内花生四烯酸的含量，从而达到加快血管内皮细胞合成一氧化氮与前列腺素一2、减少 Glu释放、加快细胞内ca2+离子向细胞外转运以降低细胞内浓度、提高抗氧化酶活性、 抑制氧自由基的形成等作用。但其对RJB的治疗作用机制尚缺乏支持研究。 血清基质金属蛋白酶(MMPs)是一组依赖钙、锌离子的中性蛋白酶，其主要功 能是降解细胞外基质，它参与了继发性脑损伤的病理过程，有研究表明，脑卒中患者 预后有一定的提示意义【6】，据此，我们推测对B后有可能使啪MP。9的表达增加。本 实验通过观察消旋．3．正丁苯酞对ⅪB大鼠海马组织MMP．9表达水平的影响，为丁苯 酞的保护作用及机制做出解释，为临床治疗提供理论与实践依据。 目的 通过对对照、模型以及采用不同剂量消旋．3一正丁苯酞治疗的放射性脑损伤大鼠 学习与记忆能力和海马组织基质金属蛋白酶．9表达量的比较，研究丁苯酞对对B脑 组织的保护性作用的机制，为临床治疗提供理论基础。 研究方法 采用健康雄性Wi咖大鼠160只(12．16周龄)，每只体重约250．300 g，随机分 为四个组，每组40只，分别为阴性对照组、丁苯酞治疗A组、丁苯酞治疗B组、阳 性对照组。阴性对照组不接受放射线照射，也不进行任何腹腔注射。其余三组均接受 同等剂量的放射线照射，之后，丁苯酞治疗A组给予6mg依g的丁苯酞注射液腹腔注 射；丁苯酞治疗B组给予2mg／l(g的丁苯酞注射液腹腔注射；放射性脑损伤组给予等 每组随机选取3只大鼠，麻醉后打开胸腔，暴露心脏，先用生理盐水心脏灌注，随后 应用4％多聚甲醛心脏灌注，待灌注完全后断头剥离完整的脑组织，并冠状位切取视 交叉后1蚴及4mm之间含有海马的脑组织，经多聚甲醛固定、沉糖过夜后制成冰冻 切片，抗原修复后行HE染色和免疫组化染色观察M