产PCA基因工程菌M18G发酵条件优化.pdf

产PCA 基因工程菌M18G 发酵条件优化 摘 要 假单胞菌株M18 （Pseudomonas sp. M18 ）是一种产荧光的根际 细菌，能分泌藤黄绿菌素(pyoluteorin, Plt ) 和吩嗪-1- 羧酸 （phenazine-1-carboxylic acid, PCA ）两种不同的抗生物质。本实验室 通过同源重组构建了M18 的gacA 基因突变株M18G 。在King’s B 培 养基中，M18G 合成Plt 的能力受到完全抑制，而PCA 的积累量比野 生型高。 为进一步提高该菌产PCA 的能力，在单因素分析的基础上，利 用Plackett-Burman 设计法和响应面分析法对M18G 产PCA 的发酵条 件进行了优化，获得的优化培养基组为葡萄糖 0.87% ，甘油 0.6% ， 乙醇0.8% ，黄豆粉4% ，蛋白胨0.4% ，pH6.5 ；最佳发酵条件为瓶装 量40/250 ，接种量4% ，种龄10.3h，温度28℃。PCA 的发酵效价由 King’s B 培养基培养时的250 mg/L 提升至1432 mg/L ，增幅为47