采用三维细胞培养的牙本质屏障细胞毒性试验研究.pdfVIP

北 京 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) · 330 · JOURNALOFPEKINGUNIVERSITY(HEALTHSCIENCES) · 技 术 =5--法 · 采用三维细胞培养的牙本质屏障细胞毒性试验研究 蒋若丹 ，林 红 ，郑 刚 ，袁慎坡 ，杜 桥 ，张 研 (1．北京大学El腔医学院 ·口腔医院口腔医疗器械检验中心，口腔材料研究室，口腔数字化医疗技术和材料 国家 工程实验室 ，北京 100081；2．北京市中西医结合医院口腔科 ，北京 100039) [摘 要] 目的：采用牙本质屏障法对4种常用的牙体充填材料和2种牙本质粘接剂进行细胞毒性试验，并与传统 的滤膜扩散法进行 比较 ，从而探讨牙本质屏障法的优势。方法：选取丁香油水门汀 、磷酸锌水门汀、粘结用玻璃离 子水门汀 、复合树脂和两种 自酸蚀粘接剂 (REMIBOND与AdperEasyOne)进行试验。牙本质屏障法中将 L929细 胞立体培养于聚苯乙烯网状支架上 ，切取人第三磨牙近髓牙本质片，用液压通透装置测量其通透性 ，选取试验区域 内通透值相近的牙本质片进行试验。将长满细胞的网状支架置于细胞培养分隔灌注小室的 “牙髓腔”，牙本质片 (“牙髓面”)紧贴网状支架放置其上，试验材料和对照与牙本质片的 “殆面”接触24h后用MTY法测量细胞的光密 度值 (D )，试验材料与阴性对照光密度值的百分比为材料的相对细胞存活率。使用非参数检验对结果进行统 计学分析。滤膜扩散法中材料与有单层细胞生长的滤膜接触24h后进行细胞染色、评级。结果：近髓牙本质片的 平均通透值为0．293 L／(rain·em cmHO)(1cmH20=0．098kPa)。牙本质屏障法中，丁香油水门汀降低细胞 存活率至82％，REMIBOND与AdperEasyOne分别降低细胞存活率至63％和54％，其余材料对细胞无损伤或损伤很 低 ；滤膜扩散法中，光固化复合树脂为中度细胞毒性、牙科粘接用玻璃离子水门汀为轻度细胞毒性，其余材料均为重 度细胞毒性；6种材料在牙本质屏障法中表现的细胞毒性明显低于滤膜扩散法的试验结果。结论：使用牙本质屏障法 测得材料与三维培养的细胞接触后的细胞毒性比使用滤膜扩散法时的细胞毒性低，结果与临床实际相关性好。 【关键词]细胞毒性试验；牙本质通透性 ；细胞存活；牙本质黏结剂 ；细胞培养技术 [中图分类号]R783．1 [文献标志码]A [文章编号]1671—167X(2015)02-0330-06 doi：10．3969／j．issn．1671—167X．2015．02．028 Dentinbarriercytotoxicitytestwith three．dimensionalcellcultures JIANGRuo．dan ，LINHong ，ZHENGGang，YUANShen-po，DUQiao ，ZHANGYan (1．DentalMedicalDevicesTestingCenter，DentalMaterialsLaboratory，NationalEngineeringLaboratoryforDigitaland MaterialTechnologyofStomatology，PekingUniversitySchoolandHospitalofStomatoloyg，Beijing100081，China；2．De— partmentofStomatology，BeijingHospitalofChineseTraditionalandWesternMedicine，Beijing100039，China) ABSTRACT 0bjective：Toevaluatethecytotoxicityoffourdentinfillingmaterialsandtwodentinadhe． sireswithadentinbarriertestandtocomparetheresultswiththoseinaconventionalfilterdiffusiontest inordertoinvestigatetheadvantagesofthedentin barriertest．M ethods：Eugenolcement，zincphos． phatecemen