微小RNA-382在肾小管间质纤维化发病中的作用及其分子机制.pdf

·589· ·基础研究· 微小RNA一382在肾小管间质纤维化发病中的 作用及其分子机制 谢婷 张慧 吴声 钟一红 丁小强 方艺 【摘要】 目的研究微小RNA一382(miR一382)在肾小管间质纤维化(TIF)发病中的作用 及相关机制。方法通过抑制miR一382的表达，观察其丰度对人近端肾小管上皮细胞(HK2) 转分化的影响，并验证miR一382与其预测靶基因热休克蛋白60(HSPDl)的互补配对关系。建 立小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型，经尾静脉注射锁核苷酸(LAN)修饰的anti—miR一382，观察 抑制miR一382表达对梗阻侧肾小管间质病变及肾组织硫氧还原蛋白(Trx)水平的影响。收集 有和无明显TIF的IgA肾病(IgAN)患者肾穿刺标本各6例，原位杂交和免疫组化法检查TIF程 度及抗氧化应激水平，分析其与miR．382／HSPDl表达的相关性。结果体外荧光素酶报告基 因检测和定点突变实验结果证实HSPDl为新的miR一382对应的直接靶基因。TGF一131诱导 HK2细胞发生转分化，与对照组相比，TGF组miR．382表达水平显著上调『(6．54±0．96)比 (1．12+0．26)，P0．05】；阻断miR一382可使TGF—B1诱导的上皮转分化部分被逆转。体内实验 结果表明，UUO模型组小鼠发生明显TIF病变，与假手术组相比，模型组miR．382丰度明显上 LNA— 调【(6．89+2．47)比(1．00±0．42)，P0．05】，HSPDl和Trx蛋白表达水平明显下调。10ms／ks anti—miR一382干预组miR一382表达下调，梗阻侧肾组织TIF程度减轻，HSPDl和Trx的蛋白表达 水平上调(均P0．05)。IgAN患者肾组织检查结果提示，与无纤维化组相比，纤维化组肾组 织miR．382丰度明显上调，HSPDl蛋白表达水平则明显降低(均P0．05)。结论miR一382在 人类及小鼠TIF发病中起重要作用，HSPDl是miR一382的直接靶基因。HSPDl表达下调导致 相应的抗氧化应激能力减弱可能是miR．382参与TIF的机制之一。 【关键词】纤维化； 肾间质； 热休克蛋白60；microRNA一382；氧化应激 MolecularmechanismofmiR一382inthe ofrenaltubulointerstitialfibrosisX／e pathogenesis Hui，Wu of Ting,ZhangSheng,ZhongYihong,DingXiaoqiang,F帆gYi．DepartmentNephrology, Institute and forKidneyDialysis，ShanghaiKey ZhongshanHospital,FudanUniversity,Shanghai andBlood 200032，China LaboratoryofKidney Purification，Shanghai Correspondingauthor：几昭Yi,Email：fang．yi@zs—hospital．sh．cn of the To theroles 【Abstract】0bjective microRNA一382(miR一382)inpathogenesis investigate ofrenaltubulointerstitial MethodsHuman fibrosis(TIF)． kidneyepithelial