《木薯苹果酸脱氢酶基因克隆和表达分析》.pdfVIP

热带作物学报 2013，34(6)：1082—1089 ChineseJournalofTrooicalCrops 木薯苹果酸脱氢酶基因克隆和表达分析 尹 奇-．一，仝 征z，贺庭琪 ，一，王力敏 ，一，黄启星z 郭运玲2，孔 华2。王旭初 1,2，郭安平2 1海南大学农学院．海南海21 570228 2中国热带农业科学院热带生物技术研究所．海南海 口 571101 摘 要 为从木薯块根中获得苹果酸脱氢酶 (MDH)基因，并研究其在转录水平的表达变化规律 ，利用 RACE技 术从木薯 “华南 8号”块根 中克隆得到了苹果酸脱氢酶基 因，其 cDNA全长 1175bp，包含 999bp的开放 阅读 框 ．共编码 332个氨基酸。从木薯 “华南 8号”中获得 的MDH氨基酸序列 ，与其它物种 的该序列相似度达 84％ 94％，包含细胞质苹果酸脱氢酶中高度保守的NAD结合基元 T“GAAGQI”和催化基元 “IWGNH”。木薯 MDH基因与块根淀粉合成相关 ．在块根发育前期表达量较低 ，膨大期表达量较高，膨大后期表达量逐渐降低 。 关键字 木薯 ；块根 ；苹果酸脱氢酶；淀粉合成 中图分类号 $533 文献标识码 A Cloning and Expression AnalysisofMalate DehydrogenaseGenefrom Cassava YINQi，一，TONGZheng2，HETingqi，WANGLimin’。，HUANGQixing GUO Yunling，KONG Hua，WANG Xuchu ，GUO Anping 1CollegeofAgriculture，Hnna University,Haikou,Hdnna 570228,China 2InstituteofTropicalBioscieneeandBiotechnology,ChineseAcademyof Tropical Agricultural Sciences，Haikou,Hainan 571101，China Abstract A 1175bp eDNA sequenceofMDH with a 999bp open readingframe，encodingaproteinwith 332 aminoacids，wasobtainedfrom cassavaSC8rootsbyRACE (rapid-amplificationofeDNA ends)tostudythe expressionalpatternofmalatedehydrogenase(MDH)mRNA．TheMDH shared84％-94％ ofaminoacidsequence identitieswithMDH from otherspecies，andcontainedatypicalNAD bindingmotif(TGAAGQI)andacatalytic motif(IWGNH)，suggestingitwasacytosolicmalatedehydrogenase(cyMDH)gene．MDHwasperhapsinvolvedin theprocessofstarch accumulation in cassava，the expression ofcassavaMDH wasup regulated during storage rootthinckening． Key words ManihotesculentaCrantz．；Tuberousroots；Malate dehydrogenase；Starch metabolism doi 10．3969／j．issn．1000—2561．2013．06．016 苹果酸脱氢酶 (malatedehydrogenase．MDH)是 MDH能可逆催化草酰乙酸和苹果酸的转化 ．但多 一 种在生物体 内广泛存在的酶．在