核黄素产生菌T30的补料发酵.pdfVIP

维普资讯 印 f 一5 c 、 |Ic÷‘ 第 18卷 无 锡 轻 工 大 学 学 报 Vol_18 第 1期 JOURNALOFWUXIUNIVERSITYOFLIGHTINDUSTRY 1999No．1 ，r}‘ ‘ 1。。／ 核黄素产生菌 Ts。的补料发酵 ／ 陆陆文文清清 章章克克昌昌 吴吴佩佩琮琮 丁【7 _ ● — — 一 - 一 (无锡轻工大学生物工程学院，无锡214o36) 1_Q 0E)、 摘要 对核黄素产生菌T 。补料发酵进行 j研 究。结果表 明，发酵液呈非牛顿特 性 ，充足 的溶氧是核黄素高产的关键 。补料发酵可 以提高核黄素的产量 ，补料以彳} 糖为主 ，补单糖或 糖均可 。补糖时间与发酵液 的pH值和 菌体生长情况 密切相 关。发酵 48h以后，控制发酵液的pH值在 5．4～6．2之 问，多次少量补糖，核黄素 的产量可提 高2O ～3O ．经补糖发酵后 ，T：。的核黄素产量可达 8g／L 以上 。 关键词巡 ；!盐垄 ；产量；阿 氏假囊酵母 分类号 TQ。～ 发画善 产生菌 。 0 前 言 朴料发酵是指在分批培养过程 中间歇或连续地补加新鲜培养基的培养方法 ，是介于间 歇发酵与连续发酵之间的一种发酵形式L1]。补料发酵可以使发酵液维持较低的基质浓度 ，解 除高浓度底物的阻遏效应 ；菌体浓度保持在适当的范围内，不再加剧供氧的困难 ；减少培养 基中有毒代谢物 的积 累。与连续发酵相 比，补料发酵对发酵过程的无菌要求相对较低 。 T 是丝状酵母，培养基过于丰富时会使苗体生长过于 旺盛 ，发酵液非常粘稠 ，传质状况很 差 ，不利于菌体的生存和代谢。另外 ，高浓度基质会引起碳分解代谢物的阻遏现象，形成阻遏 产物 。有关核黄素朴料发酵的报导较多L3l，但效果明显的不多，所得的结论也不一致 。由于 核黄素发酵周期较长，发酵过程中的各种参数相互影响，而且均处于变化之中，必须针对生 产菌种的代谢特性 ，研究菌体生长 、基质消耗与产物形成之问的关系，联系生产实际，选择恰 当的反馈参数 ，采用合适的方法进行补料 ，才能取得 良好的效果。 1 材料与方法 l_1 材料 菌种 ：T 。(属阿氏假囊酵母Eashbyii)； 发酵培养液：葡萄糖 30g／L，骨胶 30g／L，玉米浆 20mL／L，豆油 30mL／L，蛋 白胨 5 g／L，K2HPO 3g／L，NaC13g／L，MgSO~·7H2O 0．2g／L·pH值 7．0～7．2； 补料用高浓糖液质量浓度 ：500g／L； 收稿 日期 ：1g97—12-30 第一作者 陆文滑，男，1968年 2月生，工学博士 维普资讯 2 无 锡 轻 工 大 学 学 报 第 18卷 多组分补料液 ：按发酵用培养基中各组分的浓度 比例配制的高浓培养液 (豆油除外) 培养条件 ：28~30℃，往复式摇床 ，K ~410h～(Na2SO 氧化法测定)； 接种量 ：2 ～5 ． 1．2 方法 核黄素含量测定：分光光度法 ； 菌体浓度测定：干重法 (文中的菌体量和菌体浓度均 以干重计)； 糖含量测定 ：费林定糖法 。 2 结果与讨论 2．1 补料预备