《人脑胶质瘤细胞株中RIZ1基因启动子甲基化状态的研究.》.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org ChinJCancerBiother，Jun．2014，Vo1．21，No．3 · 288 · doi：10．3872／j．issn．1007-385X．2014．03．009 · 基础 研究 · 人脑胶质瘤细胞株 中RIZ1基 因启动子 甲基化状态 的研究 张晨冉 ，吴小军 ，胡刘华。，贺华 ，蒋磊 ，胡国汉 ，丁学华 ，卢亦成 (1．第二军医大学附属长征医院神经外科， 上海200003；2．上海交通大学医学院附属仁济医院 心内科 ，上海200127) [摘 要] 目的：检测4种人脑成胶质细胞瘤细胞株中成视网膜细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1(er— actingzincfingergenel，RIZ1)基因启动子区的甲基化状态，进一步认识RIZ1在胶质瘤发病机制中的作用。方法 ：应用甲基化 特异性PCR法 (methylationspecificPCR，MSP)检测4种人脑成胶质细胞瘤细胞株U87、U251、A172和I98中RIZ1基因启动子 区的甲基化水平，其中U87细胞发生甲基化，被选为后续实验对象。RT—PCR检测 U87细胞经5-Aza—CdR处理前后RIZ1mR- NA表达量的变化，MTF检测5-Aza．CdR对U87细胞生长增殖的影响。结果 ：4种人脑成胶质细胞瘤细胞株中U87和U251细 胞中检测到RIZ1基因启动子区域发生甲基化 ；U87细胞经5-Aza—CdR处理后其RIZ1mRNA的表达量上调 ；MTT法检测显示 5一Aza—CdR能抑制U87的生长增殖，且与5-Aza．CdR的浓度和作用时间呈负相关。结论 ：RIZ1基因启动子高甲基化是人脑成 胶质细胞瘤细胞株中RIZ1基因表达下调的重要机制。 [关键词] 胶质瘤 ；成视网膜细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1；甲基化 [中图分类号] R739．41；R730．231；R730．54 [文献标志码] A [文章编号] 1007—385X(2014)03-0288-05 StudyonRIZ1genepromotermethylationstatusinhumanglioblastomacelllines ZhangChenran，WuXiaojun ，HuLiuhua，HeHua，JiangLei，HuGuohan，DingXuehua，LuYicheng(1．De— partmentofNeurosurgery，ChangzhengHospitalofSecondMilitaryMedical University，Shanghai200003，China；2．De ‘ partmentofCardiology，RenjiHospitalofShanghaiJiaotongUniversityschoolofMedicine，Shanghai200127，China) [Abstract] Objective：Toinvestigatethemethylationstatusinthepromoterregionoftheretinoblastomaprotein-interac— tingzincfinger1(RIZ1)geneinfourhumanglioblastoma(GBM)celllinesaswellastheinfluenceofmethyltransferase inhibitor5-Aza-CdR onRIZ1genetranscriptionandproliferation inGBM cellswithahypermethylatedRIZ1 promoter． M ethods：ThemethylationstatusinthepromoterregionofRIZ1infourhumanGBM celllines，U87，U251，A172and T98，wereanalyzedbymethylation-specificpolymerasechainreaction．ThecelllinewithRIZ1promoterhypermethylation wastreatedwith5一Aza—Cdr．Inthetreatedc