PDTC对新生大鼠缺氧缺血后皮质和海马CA1区NFκB激活及其神经细胞凋亡的影响.pdf

PDTC对新生大鼠缺氧缺血后皮质和海马CA1区 NF．KB激活及神经细胞凋亡的影响 硕士生姓名： 李开花 指导教师： 曲云霞 教授 专业名称： 儿科学 摘 要 目的：新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)是新生儿死亡和永久性神 经系统损伤的重要原因之一。越来越多的证据表明炎症反应和凋亡在缺 氧缺血性脑损伤的发病机制中起关键作用。NF．KB是广泛存在于真核细 胞内的一种很重要的转录因子，调控许多炎性和凋亡相关基因的表达， 从而调控炎症反应、免疫应答、细胞的增殖、分化和凋亡等重要的病理 生理过程，对临床许多疾病的发生及发展起重要作用，因此针对NF．KB 的调控己成为目前许多疾病研发新药治疗的重要靶点。NF．KB活化抑制 剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)在成年大鼠脑缺血再灌注模型中具 有强大的神经保护作用，但有关PDTC对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤是否 具有神经保护作用的研究在国内外尚为少见。本研究旨在建立新生SD大 鼠缺氧缺血性脑损伤模型的基础上，检测新生大鼠在缺氧缺血(HI)后 不同时间点大脑皮质和海马CAl区NF．KBP65蛋白表达和神经细胞凋亡的 变化，探讨新生大鼠缺氧缺血后NF．1CB的活化对新生大鼠缺氧缺血性脑 损伤的影响及PDTC预处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤是否具有神经 保护作用及其作用机制。 方法：72只新生健康7日龄SD大鼠，雌雄兼用。随机分为假手术组、 HIBD组、PDTC预处理组，各组24只。每组大鼠再按缺氧缺血后l、6、 l2、24d,时不同处死时间点随机分为4个亚组，每个亚组6只。结扎大鼠 左侧颈总动脉和吸入含氧8％的氮氧混合气体制备成新生大鼠HIBD模 型。假手术组仅游离左颈总动脉但不结扎和行缺氧处理。PDTC预处理组 HIBD组大鼠均腹腔注射等体积生理盐水。采用苏木素．伊红(HE)染色 检测缺氧缺血后脑组织病理学改变；用SP免疫组化染色方法检测 测神经元变性和TUNEL细胞凋亡原位检测技术检测凋亡的神经细胞以 评价缺氧缺血对脑组织的损伤。 结果：(1)与同时间点假手术组相比，HIBD组左侧皮质和海马CAl l或 区NF．rBP65阳性细胞数和神经细胞凋亡数均显著增多(P0．0 P0．001)； 6h、l l P0．01)；(3)HIBD组内HI2h、24h各亚组左侧皮质和海马CA 区NF．KBP65阳性细胞数、神经细胞凋亡数与HI1h亚组相比，均具有统计 (4)直线相关性分析表明缺氧缺血后凋亡神经细胞 学意义(P0．05)； P0．01)。 结论： (1)新生7日龄SD大鼠脑缺氧缺血后诱导了缺血侧大脑皮 (2)过度活化后的NF．’CB 质及海马CAl区脑组织NF．KB的过度活化； 可能与神经细胞的死亡机制相关； (3)PDTC预处理对新生大鼠缺氧缺 血性脑损伤有神经保护作用，其作用机理可能与其特异性抑制转录因子 NF．KB的活化所产生的抗炎机制有关。 关键词：缺氧缺血性脑损伤 吡咯烷二硫代氨基甲酸盐 缺氧缺血 凋亡 核因子．KappaB 2 of Effect on Pyrrolidine Study and Activation NuclearFactor—tappaB on Rat