实验性脉络膜新生血管中Rap1及其相关因子表达研究.pdfVIP

目录 I螂煳 中文摘要…………………………………………………．．：：I___：：：_：：：__ji．．1 万方数据 中文摘要 实验性脉络膜新生血管中Rapl及相关因子表达的研究 摘 要 目的：脉络膜新生血管(choroidal 与引起的复杂病理过程，与许多眼底疾病视力严重损伤密切相关。然而， 由于对CNV的认识起步较晚，其发病机制及临床诊断、治疗等方面尚存 在很多亟待解决的问题。在CNV发生过程中，视网膜色素上皮(retinal pigment 细胞是CNV发生的靶细胞。正常状态下，上述两种关键细胞间存在着一 个重要的屏障，即Bruch膜。Bruch膜一旦破坏，各种刺激因素可直接或 通过RPE细胞间接作用于脉络膜毛细血管内皮细胞，从而引发CNV。 RPE．Bruch膜．脉络膜毛细血管复合体的改变与CNV的形成有关。研究发 现，小分子G蛋白Ras超家族的成员Rapl对细胞粘附连接完整性、内皮 细胞及上皮细胞屏障功能产生重要作用，且调节内皮细胞对一些促进血管 新生刺激因素的反应。那么，Rapl是否可以通过调节视网膜色素上皮屏 情况及其与CNV形成的相关性尚不明确，有待于实验研究加以证明。本 研究采用激光诱导建立大鼠CNV模型，分别从组织病理学及分子病理学 endothelial 角度观察Rapl、GTP．Rapl、血管内皮生长因子(vasculargrowth 整性，探讨其在CNV发生发展过程中的分子机制。为今后以Rapl为靶 向巩固视网膜色素上皮屏障的完整性，提供研究基础。 方法： l实验性脉络膜新生血管中Rapl表达的研究 1．18．10周健康棕色挪威(Brown Norway，BⅫ大鼠30只，雌雄不限，双眼 前节及眼底检查均正常，随机分为6组，每组5只，10只眼。分别为空白对 照组、激光后3d组、激光后7d组、激光后14d组、激光后21d组、激光后28d 组。 1．2CNV模型的建立：除空白对照组外，其他各组大鼠均采用氪激光建立 万方数据 中文摘要 击穿为标志。 fundus 生率。 织制作石蜡切片。选取有明确血管化的激光斑处做切片，常规HE染色光 镜观察各组标本视网膜脉络膜的组织形态学改变，免疫组织化学法检测 Rapl的表达情况。 1．5图像分析与统计学处理 采用SPSSl9．0软件对所得各时间点显微镜下阳性染色率进行分析， 观察正常组织中Rapl及各时间点光凝组织中Rapl的表达差异。 研究 2．18．10周健康棕色BN大鼠30只，双眼前节及眼底检查均正常，随机分 为6组，每组5只，1O只眼。分别为空白对照组、激光后3d组、激光后 7d组、激光后14d组、激光后21d组、激光后28d组。除空白对照组外， 其他各组大鼠均采用氪激光建立CNV模型。参数：波长647nm、光斑直 以见到有气泡产生提示Bruch膜被击穿为标志。 采用Western 表达情况。 只眼，行Real．Time VEGF及p．catenin基因的mRNA转录水平的变化情况。 1 2．4采用SPSS9．0软件对所得数据进行统计学分析。 结果： 1实验性脉络膜新生血管中Rapl表达的研究 1．1FFA检查：激光后14d光凝区出现大片圆盘状荧光素渗漏；激光后21d 万方数据 中文摘要 有荧光渗漏的光凝斑数达到高峰；激光后28d荧光渗漏光凝斑数无明显增 加。 呈显著的纤维血管增殖，可见大量新生血管生成。 1．3Rapl在激光后3-28d的表达情况与空白对照组均为弱阳性表达，且无 明显变化，主要见于视网膜内核层、外核层、视网膜色素上皮层、脉络膜 血管内皮细胞胞浆、胞核。并且各