副鸡禽杆菌免疫优势模拟表位鉴定及免疫原性分析.pdfVIP

摘要 性疾病。副鸡禽杆菌有A、B、C三种血清型，其有效保护性抗原成分至今尚不明了．本文利用 原核表达系统成功表达了副鸡禽杆菌三个血清型菌株的血凝素蛋白，并分析了重组血凝素蛋白的 免疫原性；应用噬菌体肽库技术筛选和鉴定出副鸡禽杆菌的2个免疫优势模拟抗原表位，分析了 模拟抗原表位的免疫原性，研究结果为进一步研制与开发鸡传染性鼻炎新型疫苗奠定了基础。 列，分别设计特异性引物，采用PCR技术扩增出副鸡禽杆菌三种血清型菌株的血凝素基因，序 列测定结果表明，三种血清型的血凝素基因全长分别为l035bp、l038bp和l026bp。分别将PCR 菌阳性血清特异性结合，并且都具有凝集鸡红细胞的活性．用纯化的重组血凝素作为免疫原分别 免疫鸡，其血凝抑制抗体滴度均达到l：10以上；用相应菌株攻毒后，部分免疫鸡获得了保护， 大部分试验鸡出现鼻炎症状，三种重组血凝素的保护率分别为3110，2110和2／10。由此表明，重 组血凝素蛋白具有良好的免疫原性，但不能诱导足够的免疫保护。结果提示，血凝素可能不是副 鸡禽杆菌的惟一保护性抗原。 位，结果发现在血凝素蛋白的第86位氮基酸和第186位氨基酸的附近区域可能是2个表位区， 抗原抗体结合试验表明，构建的重组菌不具有与副鸡禽杆菌抗体结合活性，提示选定的2个血凝 素蛋白的线