实验性脑出血大鼠下丘脑组织蛋白质组学及研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………3 研究论文 实验性脑出血大鼠下丘脑组织蛋白质组学研究 前言………···……······………···…………·········…………………6日lJ吾““””“”“”““””””””“”“”一””““””””””“”””“”””6 材料与方法………………………………¨…………………………7 结果···························…················································12 附l药··············································································15 附表……………………………………………………………………20 讨论··············································································23 结论·····························-················································34 参考文献………………………………………………………………34 综述神经系统疾病和下丘脑植物神经功能紊乱………………………40 致谢····················································································49 个人简历……………………………………………………………………50 中文摘要 实验性脑出血大鼠下丘脑组织蛋白质组学研究 摘 要 目的：脑出血(in舰cerebral 它是指脑动脉、静脉或毛细血管破裂所致脑实质内的出血，占急性脑血管 病的20％一30％，致残率和病死率均较高，严重危及人类的生命和身体健康。 脑出血并发下丘脑植物神经功能紊乱近年来备受国内外研究者的关注，其 发生严重影响了患者的预后。较常见的植物神经功能紊乱的症状包括应激 性溃疡、中枢性高热以及水电解质紊乱等。应激性溃疡是急性卒中最严重 的并发症之一，对其积极预防及治疗在一定程度上可以改善患者的预后。 脑出血后合并中枢性高热则常常提示病情危重，死亡率大大增加。下丘脑 作为整合中枢和垂体、脑干等其他部分发生纤维联系涉及神经内分泌、体 温调节、摄食、饮水、睡眠觉醒周期及生殖等自主功能的调节。由此可见， 直接对下丘脑组织进行研究必定会更加直观的揭示ICH后并发上述常见 的植物神经功能紊乱的病理生理机制。 蛋白质是基因功能活动的最终执行者，是生命现象复杂性和多样性的 直接体现者。蛋白质组学技术的兴起是生命进入后基因组时代的标志。它 是从整体的角度研究蛋白质的特征，包括蛋白质的表达水平、翻译后修饰、 蛋白与蛋白之间的相互作用等，揭示蛋白质功能与细胞生命现象之间的规 律。差异蛋白质组学则是分析不同生物体在不同时刻或者状态下蛋白质表 达上的差异，为探索细胞分子机制及寻找治疗药物靶点提供了可能性的依 据。 本研究通过对大鼠脑出血模型的制作，对正常下丘脑组织和脑出血 72小时下丘脑组织进行差异蛋白质组学研究，找出有差异表达的蛋白质， 以期探寻脑出血后并发下丘脑植物神经功能紊乱的病理生理机制，为进一 步筛选特异性功能相关蛋白和药物干预靶位提供线索。 方法： 1．制作大鼠脑出血模型，于72小时处死动物，取下丘脑组织。空白 对照组取相应部位脑组织。2．提取下丘脑组织的总蛋白，利用双向电泳 (2．DE)技术比较大鼠脑出血72小时下丘脑组织和正常对照组下丘脑组织 中文摘要 蛋白的差异表达。第一向等电聚焦电泳、第二向垂直SDS．PAGE电泳后， 以硝酸银或考马斯亮蓝R250染色。投射扫描双向电泳凝胶图，得到图谱 Master2D 后用Image Elite软件进行图像分析。对感兴趣的蛋白点从凝胶 上切下，胶内蛋白质