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第十五章 目标产品的蛋白质分析检测技术与质量控制 本章的主要内容 蛋白质含量和纯度 氨基酸的分析 蛋白质的分子量测定 蛋白质的等电点 肽谱 蛋白质突变点的分析 蛋白质的二硫键的分析 遗传工程产品蛋白质的纯度要求：95%、99%、99.9%。 常用鉴定蛋白纯度的方法：聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS、毛细管电泳（CE）、等电聚焦（IEF）、HPLC（包括凝胶过滤、各种反相HPLC、离子色谱、疏水色谱） 新的方法：如质谱法，仅pmol的样品就能测定，同时能给出分子量。 注意：只用一种鉴定蛋白纯度的方法是不够，往往几种 （方法，机理）结合使用。 二、氨基酸分析 检测法的种类： 氨基酸进行UV检测只能利用羧基（-COOH）在200～210nm处的吸收。一部分具有苯环的氨基酸也可在250～280nm检测，但是，一般对原物质（氨基酸）进行高灵敏度、良好选择性的分析比较困难。 因此，很早以来就使用衍生法，利用许多氨基酸构造中存在的氨基（-NH2，-NHR），使用与该基团可进行选择性反应的衍生试剂。 检测的仪器：HPLC或氨基酸分析仪 两类方法： 柱后反应法： 将游离的氨基酸经色谱柱分离后，氨基酸再与显色剂（茚三酮[吸光度检测]、荧光胺、邻苯二甲醛[荧光检测]）作用，然后导入检测器。 优点： 反应可自动化，定量定性、重现性优异。 由于反应前试样成分在柱中分离，“杂质”被去除，比较稳定。 柱前衍生