《SULT281影响小鼠Hepa1-6肝癌细胞的HIF-1α，糖酵解及血管新生.》.pdf

复 里亏提 医学版 Fudan Univ J Med SSci 2山。13Nu。 ．‘，’4叶¨J【(＼u6) 653 U niv SULT2B1影响小鼠Hepal一6肝癌细胞的 HIF—la，糖酵解及血管新生 杨晓明 李晓波 殷莲华 (宁夏医科大学基础医学院病理生理学系 银川 750004；复旦大学基础 医学 院生理与病理生理学系 上海 200032) 【摘要】 目的 研究羟基类 固醇硫酸基转移酶 SULT2B1对小 鼠Hepal一6肝癌细胞 HIF-Ia、糖酵解及血管新生 能力的影响，并探讨其可能的作用机制。方法 分别用 SULT2B1过表达及干扰载体感染 Hepal一6细胞，采用 Real—timePCR和Westernblot检测过表达 ／干扰 SULT2B1对HIF-1d表达水平的影响，同时检测糖酵解相关基 因HK一Ⅱ和 LDH 的 mRNA表达水平。CCK一8法检测干扰 SULT2B1的肿瘤条件培养基 (tumorconditioned medium，TCM)对小 鼠脑微血管 内皮细胞 bEnd．3增殖能力的影响，并检测 VEGF的mRNA表达水平 。建立 Hepal一6细胞裸鼠移植瘤模型，免疫组化染 色检测裸 鼠瘤组织 中CD34的表达水平 。结果 过表达 ／干扰 sULT2B1可分别上调 ／下 调 HIF-1a的 mRNA及蛋 白表达水平 ，且干扰 SULT2B1可使 HK一Ⅱ和 LDH 的 mRNA表达水平 降低 ，过表达发生相反 的变化 (PO．05)。干扰 SULT2B1的TCM 可抑制 bEnd．3细胞 的增殖 能力，并降低 VEGF的mRNA表达水平 (P0．05)。同时，干扰 SULT2B1可降低 Hepal-6细胞移植瘤在裸 鼠 体内的生长并降低瘤组织 中的微血管密度(P0．05)。结论 干扰 SULT2B1可抑制 Hepal一6细胞 的糖酵解及 血管新生能力，其作用主要与下调 HIF-1a、HK—lI、LDH及 VEGF的表达水平有关 。 【关键词】 肝细胞肝癌 ； 羟基类 固醇硫酸基转移酶 SULT2B1； HIF-1a； 糖酵解 ； 血管新生 ； 小鼠 【中图分类号】 R735．7 【文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1672—8467．2013．06．005 TheeffectofSULT2B1onHIF—ltz，glycolysisandangiogenesis in Hepal_6hepat0cellularcarcinomacellsin m ice YANG Xiao～ming，．LIXiao—bo ．YIN Lian—hua△ (DepartmentofP口 0声 0￡0g ，SchoolofBasicMedicalSciences，NingxiaMedicalUniversity， Yinchuan750004，NingxiaHuiAutonomousRegion，China；DepartmentofPhysiologyand Pnth0ph si0logy，SchoolofBasicMedicalSciences，FadanUniversity，Shanghai200032，China) [Abstract1 Objective To investigate the effectand possible mechanism ofhydroxysteroid sulfotransferase2B1(SULT2B1) on HIF-1a，glycolysis and angiogenesisin mouse hepatocellular carcinomaHepal～6cells． M ethods Hepal一6cellswereinfectedwithSULT2B1overexDressionand interferencevectorsrespectively．HIF一1aexpression levelsfollowedbySU