若干植物活性成分与蛋白质相互作用及研究.pdfVIP

摘要 摘要 本论文主要运用荧光光谱、紫外．可见光谱、红外光谱(FT_IR)、圆二色谱 (CD)及原子力显微镜、分子模拟等技术，对蛋白质与植物活性因子的相互作 用进行了研究，并通过蛋白质内源荧光的猝灭、二级结构变化和外源物质对蛋 白质．药物分子结合过程产生的影响等方面的研究，从分子水平上阐述蛋白质与 植物活性因子的作用机制，对了解药物在体内的运输、代谢、分配过程以及新 药的设计与开发都具有重要的意义。 论文共分为五个部分，主要结论概述如下： 构、功能和性质；综述了药物小分子与蛋白质相互作用的研究现状和研究方法， 并着重介绍了荧光光谱法、红外光谱法以及圆二色谱法在本研究领域的应用情 况。 7．4)，采用荧光光谱法、紫外．可见光谱法、傅里叶 2．在生理酸度条件下(pH 变换红外光谱法以及圆二色谱法研究了杜鹃素与BSA的相互作用。研究表明， 杜鹃素与BSA相互作用形成了新的复合物，即杜鹃素以静态猝灭方式猝灭BSA 的内源荧光；热力学参数焓变(△日)和熵变(△S)值分别为_29．92kJ·mol-1和 5．061 J-mol-l-K-1，表明二者之间的作用力主要是氢键和疏水作用力。竞争实验 表明，杜鹃素在BSA上的结合位点位于SiteI。FT-IR和CD光谱结果证实杜鹃 和葡萄糖对杜鹃素．BSA结合的扰动。 3．采用荧光、共振瑞利散射、圆二色等光谱方法和原子力显微镜(AFM)以 及分子对接技术，研究了金丝桃苷与人血清白蛋I刍(HSA)的相互作用。研究发现， 金丝桃苷能显著猝灭HSA的荧光，且金丝桃苷与HSA结合主要靠疏水作用力 和氢键驱动。CD谱显示，金丝桃苷诱导HSA的二级结构产生稍许的变化。AFM 图像和共振散射光谱表明，与金丝桃苷结合后HSA的分子直径变大，产生相互 聚集。利用分子对接技术预测金丝桃苷与HSA的作用区域位于HSA亚结构域 IIA，预测结果与位点竞争实验结果吻合。 4．采用荧光光谱法、紫外光谱法、红外光谱法、圆二色谱法和原子力显微 镜研究了香叶木素与人血清白蛋白的结合作用。研究表明，静态猝灭是香叶木 摘要 素导致HSA荧光猝灭的主要原因；由求得的热力学参数，确定了二者之间的作 用力是疏水作用。竞争实验和不同构型的HSA与香叶木素作用实验表明，香叶 木素在HSA上的结合位点位于Domain IIA的疏水腔中，即SiteI。FT-IR和CD 光谱分析表明，香叶木素能够使HSA的构象发生变化。AFM和共振锐利散射光 谱显示金丝桃苷能与HSA结合并导致HSA分子聚集。 7．4)，研究了芒果 5．应用荧光光谱和圆二色谱技术，在生理酸度条件下(pH 苷与胰蛋白酶的相互作用。实验揭示了芒果苷能与胰蛋白酶结合形成基态复合 物从而猝灭胰蛋白酶的荧光。由van’tHoff方程求得的热力学参数，表明芒果 苷和胰蛋白酶之间的作用力类型是疏水作用。根据F6rster非辐射能量转移理论 计算出芒果苷在胰蛋白酶中的结合位置与胰蛋白酶中色氨酸残基间的距离为 3．99 nlTl。三维荧光光谱和圆二色谱显示，芒果苷诱导胰蛋白酶的二级结构发生 部分变化。 关键词：杜鹃素；金丝桃苷；香叶木素；芒果苷；牛血清白蛋白；人血清白蛋 白；胰蛋白酶；荧光光谱；紫外光谱；傅立叶红外光谱；圆二色谱；原子力显 微镜；分子模拟 Abstract Abstract Inthis interactionofsome active with were thesis，the plant componentsproteins studied different v／z．，fluorescence，UV—．Vis using techniques transform circular