三叶草、猪屎豆和含羞草根瘤菌多相分类及系统发育及研究.pdf

摘 要 本论文从根瘤荫的分类、系统发育以及研究方法等方面对根瘤菌的研究进行了综述，并对未 来根瘤菌的应用发展作了展望。本研究通过采用16SrDNAPCR-RFLP分析、表型数值聚类分析、 全细恕蛋白SDS、t6SrDNA全痔列分析翥l 分离自三叶草、猪墚豆和含羞草的根瘸菌进行了多相分类研究。 85株供试菌株经过16S rDNAPCR-RFLP分析，结聚表明分离自这三种植物的根瘸菌具有较 大的遗传多样性，分离自三时草的根癯菌具有抉生、慢生、中慢生萤株，归于Rhizobiwn、 菌也毒慢生和挟生蘸株，归于Rhizobiura和Bradyrhizobimn两个系统发育分支。 通过对70株供试菌株128项生理生化和抗性研究，发现了一批抗逆性强的蓊株，可以耐黼盐 和高浓度的抗生素。透过聚类分析，在84％的相戗性承平上，有41个蓥株聚群，构成6个袭观 群，其中群1、群4和群6没有与参拢菌株浆在一起，可能为薪的分类单元。表型数馈分类结果 与16S rDNAPCR-RFLP分析结果基本一致。但在个别菌株的归群上也存在一些差异。 为了验证这两种方法聚群的结果，进行了85株菌株的全细胞蛋白SDS．PAGE电泳分析，聚 类结果发现应用该方法获得的群较多，在80％的相似水平上划分为10个群，并将一些在以上两 种方法没有聚群的菌株重新归群。 经t6S 的Cr+Cm01％范围内。这群根瘤蔚分离自猪屎豆和三叶草，应与B．japonicum同秤。 经16S 掰结癌_稻全细胞蛋翻电泳分子检测，确认是撮癯蘸。通过序列相似性计算，发现与Burkholderia已 知种16S rDNA序列相似程度为93--98％，应是继B．phymatum Ralstonia枷M№w船之后又一个发现存在予细菌变形耔菌门铲纲的撮瘤菌。 综合以上研究发明，供试藏株在袭型和遗传型特性上存在根大的多样性，本研究中将分离自 三叶草的部分根瘤菌定为Rhizobium属的一个新种，并发现分离自三叶草的其它菌株还存在于 Burkholderia系统发育分支。 荧键词 根瘤菌， 多捆分类， 系统发育， 分类地位 ABSTRACT the This reviewed rhizobial mainmethods recently systematics，summarized paper developed in rhizobia applied taxonomy． studied from andMimosawere withthe RhizobiaisolatedTrifolium，Crotalaria together referenceofsome strains rhizobial recognizedspeciesbyperformingpolyphasictaxonomy, rDNA ofwhole-cell 16S PCR-RFLP,numerical including taxonomy,SDSprotein rDNAfull ofDNAbase length test,determination analysis，16S sequencing，nodulate composition andDNA-DNA hybridiz