抗菌肽CecropinAD在毕赤酵母中的组成型表达及中试发酵研究.pdfVIP

《饲料工业》·2011 年第32 卷第19 期 试验研究 抗菌肽 Cecropin AD 在毕赤酵母中的组成型 表达及中试发酵研究 江学斌 张敏静 林健聪 梁世中 摘 要：构建表达抗菌肽Cecropin AD 蛋白的真核重组表达质粒pGAPZα-A-CAD，并转化酵母菌 Pichia pastoris X-33，Zeocin 抗性筛选阳性重组子，通过PCR 鉴定、Tricine-SDS分析和琼脂孔穴扩 散法筛选获得抗菌肽CAD 组成型表达菌株，并采用pH-溶氧监控策略进行工程菌Pichia pastoris X-33/ pGAPZα-A-CAD 的50 L 中试发酵研究。结果表明，本实验成功实现了抗菌肽CAD 在毕赤酵母Pichia pastoris X-33 中的组成型表达pGAPZα-A，Tricine- SDS- PAGE 分析显示在4.0 kDa 处有明显的目的条 带，工程菌经50 L 发酵罐培