松花粉的质量评价方法研究.pdfVIP

摘要 松花粉是我国传统食药兼用的花粉类中药，具有丰富的营养价值和多种生物 活性，无论在临床应用还是保健品开发方面都具有广阔的前景。针对松花粉的应 用越来越广泛，而松花粉的基础性研究薄弱等问题，本课题从资源调查与鉴定、 化学成分的分离纯化与鉴定、有效部位的含量测定、指标成分的含量测定、指纹 图谱、抗氧化性生物效价评价等方面对松花粉进行质量评价研究，以期建立松花 粉的质量评价体系，为松花粉质量标准的制定提供依据。同时为加速松花粉产品 的开发，发展松花粉食品、保健品、药品、化妆品和添加剂等提供条件。 一．松花粉的鉴别 通过调查发现受植物分布数量以及地方经济发展情况的影响，形成规模采 massonianaLamb、 收、在市场上流通的松花粉的资源植物的主要有：马尾松Pinus 油松Pinus Faranch。由于松花粉花 tabulaeformisCarr．)及-Er南松pinusyunnanensis 粉壁影响其成分的提取和吸收，因此市场上有破壁松花粉与未破壁松花粉之分， 并且其价格存在较大的差异。由于松花粉价格较高，市场上流通的松花粉掺伪情 况也较严重。 ． 收集了以上三个品种的松花粉。对其进行了性状和显微的鉴别。松花粉的破 壁与否通过两种方法都可以鉴别，而通过显微鉴别同时测定了不同产地的三种松 花粉(油松、马尾松、云南松)的长径、短径及气囊长径，发现此三种的差异： 油松花粉的最小，云南松的花粉直径最大，马尾松花粉的则略小于云南松。同时 显微鉴别也有利于观察松花粉的掺伪情况。 二．松花粉化学成分的研究 对云南松松花粉的三氯甲烷部位的化学成分进行了分离鉴定，得到2种成 首次在松花粉中分离得到。 首次建立了HPLC测定松花粉中柚皮素与芦丁的含量的方法，并对13批松 花粉进行了含量测定。结果表明，松花粉中柚皮素的含量较高，芦丁的含量较少。 柚皮素的平均含量为0．207 mg·g～，芦丁的平均含量为0．0014mg·g一。不同产 地松花粉中柚皮素的含量存在较大差异，芦丁的含量差异不大。 用紫外分光光度法测定了松花粉总甾醇、总黄酮、总多糖的含量。试验结果 表明，不同来源松花粉中总黄酮(0．16～0．75％)和总甾醇(0．98～7．67％)的含量 差异较为明显，而总多糖的含量则相差不大(5．25～6．98％)。 三．松花粉抗氧化性的生物效价评价研究 生物活性效价评价在中药有效成分不明确或不确定的情况下，更显重要。首 次采用紫外分光光度法以清除DPPH和羟基自由基的能力为指标，对松花粉的抗 氧化性进行研究。结果表明松花粉提取液对DPPH与羟基自由基均有清除作用， 且都呈明显的量效关系；松花粉与破壁松花粉清除DPPH的平均IC50分别为14．86 一 ● gL～、12．95gL～，清除羟基自由基的平均1Cso分别为20．31g·L-1、3．45gL～。建 议把松花粉的清除自由基的能力作为衡量其质量的标准之一，其清除自由基的 IC50作为其质量控制的指标。 四．松花粉抗氧化作用与化学成分的关联 · 把松花粉总黄酮、总甾醇及总多糖的含量与松花粉的清除羟基自由基与 DPPH的作用进行了线性关联及多元相关性关联，结果表明松花粉总黄酮、总甾 醇的含量与清除DPPH自由基、羟基自由基的IC50呈负相关，并以总黄酮的相 关性最为突出，而总多糖的含量则与其关联性不显著。推断黄酮类成分是松花粉 抗氧化作用的主要有效成分。 柚皮素属于松花粉黄酮类成分的一种，并且柚皮素具有良好的清除自由基的 作用，通过关联分析也表明，松花粉的柚皮素含量与其抗氧化活性关联性较大。 因此，可以把松花粉中柚皮素的含量作为松花粉质量评价的一个量化指标。建 议松花粉的质量标准中加入柚皮素的含量测定。 五．松花粉指纹图谱的研究 首次建立了松花粉HPLC指纹图谱的方法，对松花粉进行了指纹图谱的研究