奶牛乳腺上皮细胞和奶牛脐带间充质干细胞共培养的试验及研究.pdf

||llJ l I llJ I I llllllI I Il Y2697938 本文是国家奶产业体系(CARS-37) “十二五国家科技支撑项目“牧区及农牧交错带奶 牛健康养殖技术集成及产业化示范 12BADl (20 2809)；“现代农业(奶牛)产业技术体系 建设专项资金资助(SupportedbyChina cultureResearchem)(CARS一37)； Agri Syst “新疆肉牛安全高效饲养关键技术研究与示范 (2011BAD47802)； 不同用途马高效、安全养殖共性技术研发 12BAD45BO (20 1)；新疆肉乳用草食动物营养实验室 开放课题资助；自治区重大专项“新疆农区奶牛健康 的部分研究成果。 课题主持人：余雄教授 (新疆农业大学动物科学学院) 万方数据 奶牛乳腺上皮细胞和奶牛脐带间充质干细胞共培养的试验 研究 摘要 为了研究UC．MSCs与BMECs共培养的最适浓度比和最佳作用时间及其作用 时观察各组细胞的形态变化，用MTT法检测细胞增殖，测定细胞贴壁率，并检测 I、 UC．MSCs在畜牧生产上的研究应用提供新的思路和理论依据。 结果显示：体外分离培养的UC—MSCs细胞形态均一、具有成纤维样细胞外 观，排列紧密，有一定方向性；通过碱性磷酸酶染色后可见细胞呈深棕红色；能 够被诱导为成脂、成骨细胞；将UC—MSCs和BMECs按照不同浓度比混合共培养 后，细胞生长状态良好，无抑制作用；MTT检测增殖发现l：2浓度组OD值最高， 均达到最高，随后下降；共培养后细胞贴壁率与时间成正比，其中1：2浓度组细 培养后，1：2浓度组培养液上清中的EGF水平显著高于1：1000组、单纯UC．MSCs 泌水平在各组之间差异均不显著，但1：2组的分泌量最大，各组HGF分泌量在72h 万方数据 异显著(PO．05)；PK活性在1：2浓度组达到最高，且1．1、1：2浓度组活性显著高 于1：1 000、BMECs单纯培养组(尸O．05)，且其活性随着时间增加逐渐增强，在 加呈逐渐下降趋势，Oh组与其他各组相比均差异显著(P0．05)，72h组与0h、 共培养组的CeOI活性变化不大，除1：100、1：1000、2：1组外，其余各个共培养 组的CcO 低，显著低于除48h组之外的各组(P0．05)。 本试验研究得出以下结论：①本试验成功的在体外分离培养出奶牛脐带间充 质干细胞。②本试验成功的建立Yuc—MSCs和BMECs共培养体系，通过试验摸 索发现UC．MSCs和BMECs比例为l：2的浓度组，培养至第72h时各项指标最佳。 ③uc—MSCs丰0BMECs共培养能够促进共培养体系细胞增殖，提高细胞贴壁率。 I 的葡萄糖代谢水平。⑥uc．MSCsSDBMECs共培养能够抑制共培养体系中CcO 活性，降低TNF—a币DTNF．B的分泌。 关键词：脐带间充质干细胞；乳腺上皮细胞；细胞增殖；细胞因子：细胞凋亡； 葡萄糖代谢 万方数据