细胞芯片.ppt

生物芯片细胞芯片 细胞芯片的功能 芯片上实现对细胞的精确控制与运输 在芯片上完成对细胞的特征化修饰 在芯片上实现细胞与内外环境的交流和联系 细胞芯片的特点 在芯片上实现对活细胞的原位监测，可以多参数高通量的直接获得与细胞相关的大量功能信息(即关于细胞对各种刺激的应答信息 通过活细胞分析，获得细胞相关的分析信息(主要是关于各种刺激物的数量、质量等相关方面的信息) 利用显微技术和纳米技术能精确的控制细胞内的生物化学环境，以细胞作为化学反应的纳米反应器，便于详细的研究揭示细胞内一系列过程和原理的本质 细胞芯片的种类——整合的微流体细胞芯片 整合的微流体细胞芯片 整合的微流体细胞芯片是一种高度平行化、自动化的集成微型芯片装置，对细胞样品具有预处理和分析的能力 ，又称微全分析系统。通过在芯片上构建各种微流路通道体系，并运用不同的方法在流体通道体系中准确控制细胞的传输、平衡与定位，进而实现对细胞样品进行药物刺激等实验过程的原位监测和细胞组分的分析等研究 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞免疫芯片 细胞免疫芯片是一种新型的细胞芯片技术，是在蛋白质芯片的基础上发展起来的。是以细胞为研究对象，利用免疫学原理和微型化操作方法 ，实现对细胞样品的快速检测和分析。它的免疫学基础是抗原或抗体的固相化、抗原抗体特异性反应及抗原或抗体的检测方法(如荧光标记、酶标记及放射标记等) 。在芯片上固定的抗体或抗原必须保持原有的免疫学活性 ，在测定时，受检标本(测定一般为细胞表面的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体进行反应，通过免疫学特异性反应捕获 目标细胞，然后根据标记与否以及标记物的不同选择不同的检测方法，快速完成对细胞的检测 ，并且可以对细胞进行免疫化学测定等后续研究 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞免疫芯片的特点 ①利用抗体和细胞表面抗原的特异性反应原理，检测表达特异性表面抗原的细胞，具有较高的特异性； ② 由于芯片的密度较高，获得的信息量较大 ，可以高通量、高平行性的综合检测、分析细胞样品，一次可以检测同一或不同样品细胞的多种表达抗原； ③适用范围广 ，凡是可以制成细胞悬液的样品均可进行检测； ④操作简便灵活，染色、标记等步骤可根据实验要求增加或删减，经济方便，无须价格昂贵的检测设备 ，普通显微镜即可检测，经济实用。 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞免疫芯片的制作 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞免疫芯片的制作 胞免疫芯片的制备主要以玻片为基底 ，通过对玻片表而进行化学修饰，以使生物分子固定后仍保持原有的生物活性。玻片表面的化学修饰有多种方式，三维修饰如琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等修饰 ；二维修饰如醛基 、氨基等修饰。琼脂糖修饰由于具有操作简便 、对生物分子的固定能力较强而应用较多。将所需要的抗体或抗原样品按一定的排布方式点样到经过修饰的玻片上，形成微阵列芯片。被检测细胞悬液(荧光标记或非标记)在微阵列芯片上进行孵育结合后洗去未结合的细胞，则被检测细胞被捕获于芯片表面。可以直接在芯片上检测 ，也可以将 目标细胞洗脱后培养进行问接检测。直接检测快捷简单，对于荧光标记的细胞免疫芯片，用激光扫描细胞仪进行扫描，然后通过计算机分析出每个点的平均荧光强度。对于酶标记的细胞免疫芯片，只须显色后将检测细胞放在光镜下观察，用 CC D 照相机进行拍摄记录结果即可，将信号通过计算机处理得到每个点的灰度。间接检测根据对样品的要求不同而采用不同的方法。 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 化学修饰：以使生物分子固定后 仍保持原有的生物活性 细胞标记与检测 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞免疫芯片的应用 细胞免疫工程包含生物医药学方面研究基因组序列功能和病理学相关 的核心技术与内容。细胞免疫芯片为分子医药学发展靶向免疫诊断、治疗肿瘤和其他细胞表面抗原相关疾病提供了一种新型研究方法。由于细胞免疫芯片对生物样品的要求较低，使得样品的预处理大为简化，因此，应用范围广泛 ，凡是可以制成细胞悬液的样品都可以进行检测 ，如淋巴细胞悬液、其它细胞或组织等生物样品等。 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞芯片的种类——细胞免疫芯片 细胞免疫芯片的应用案例： 利用红细胞为材料研究细胞免疫芯片在细胞检测方面的初步应用该实验分别在正常的外周血白细胞、慢性 白血病细胞、多毛白细胞、上皮淋巴细胞、急性淋巴白细胞、T 细胞介导的急性淋巴白血病细胞等样品中获得了清楚且重复性好的结果 ，并验证了48 种分化抗原(CD )在芯片上和流式细胞仪上分析结果的吻合性 ，在白血病的辅助诊断和预后判断等方面都提供了充足的理论依据 ，显示了细胞免疫芯片应用在白血病免疫诊断及预后判定