大鼠子宫全层损伤修复模型的实验的研究.pdf

中文摘要 大鼠子宫全层损伤修复模型的实验研究 东南大学医学院 研究生：林娜成 导师：胡娅莉教授 摘 要 目的： 建立SD大鼠子宫全层损伤后修复模型，并探索大鼠子宫损伤后形态及功能 重建的规律，为组织工程修复子宫的研究提供合适的动物模型及理论依据。 方法： 1．选取sD大鼠为实验动物，制备子宫全层损伤后修复模型，根据子宫损伤范围 组(假手术)四组，对大鼠的围手术期和术后恢复情况以及子宫创面的愈合 情况进行观察。 2．SD大鼠在子宫全层损伤术后1周、2周、4周、8周、12周，每次lO只大鼠 20只子宫取材，取材范围包括双侧子宫全层，以D组假手术子宫为对照组。 取材后记录子宫狭窄、堵塞情况，将宫腔通畅的子宫固定，取手术区中央部 位组织连续切片，行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色。 3．SD大鼠子宫全层损伤术后12周，20只大鼠共40只子宫分为四组。选择已证 明有生育能力的SPF级成年雄性SD大鼠，与受试雌鼠1：1连续合笼交配过 夜，以托盘查见阴栓的首日记为妊娠O日，同时观察雌鼠体重及腹形变化， 于妊娠中晚孕期开腹探查受试雌鼠双侧子宫的受孕情况及胚胎情况。 结果： 1．雌性SD大鼠的生殖器官解剖特点为：子宫呈“Y’’形，左右两侧子宫完全分 开，形成两个单独的子宫，长约2．5～3cm，有两个独立的子宫颈，分别开口 于阴道；双侧输卵管色泽红润，粗细均匀，在宫角末端包绕卵巢；子宫动脉 支由卵巢动脉发出，系膜缘血运丰富。手术建模过程顺利，术后麻醉复苏顺 利，手术切口未见感染、血肿等并发症。预期时间段行组织学和功能学实验。 中文摘要 2．大体观察：术后各时间段A组子宫多为通畅，B组、C组宫腔堵塞、积液、脓 肿较多。术后l周，手术区炎症反应明显，局部管腔狭窄、凹陷；2周炎症 开始减退，A组、B组创面已被组织覆盖，C组仍有创面尚未完全闭合；2周 至4周，A组、B组局部管径渐接近两侧正常子宫，C组管腔仍有狭窄；4周 至12周，手术区外观渐接近正常。 3．宫腔通畅率比较：A、B、C三组子宫全层损伤术后宫腔通畅率分别为：96％、 84％、56％，采用矿检验进行比较，三组问差异有统计学意义(P_o．002)。两 两比较A组与C组差异有统计学意义(P=0．001)。 4．手术区子宫内膜厚度测量：A组子宫内膜厚度随术后时间的延长而增厚，术后 1周，手术区子宫内膜很薄，术后1～2周增加明显，2周以后增加趋势渐缓。B 组、C组手术区子宫内膜薄弱，且随术后时间的延长未见明显增厚。同一时 间点A、B、C三组手术区子宫内膜厚度比较：A组与B组相比，术后8周 计学意义。 5．HE染色观察上皮再生：术后1周，光镜下观察发现，A、B、C三组手术区即 可见单层柱状上皮细胞再生，排列紧密，与其下内膜固有层界限清晰。 6．Masson染色观察胶原纤维和平滑肌：术后2周，手术区胶原纤维含量较多， 细胞数目较少，手术区肌壁由内膜及纤维结缔组织替代，平滑肌纤维少见或 未见。 7．平滑肌肌动蛋白铲S姒免疫组织化学染色观察平滑肌修复：同一时间点A、B、 C三组手术区平滑肌细胞含量(铲S㈣)比较：A组与B组相比，术后4周 8周(P<0．01)、12周(P<0．01)差异均有统计学意义。 8．SD大鼠子宫全层损伤术后12周功能学评价：A组、B组、C组、D组妊娠率 分别为：80％、60％、30％、100％，四组妊娠率比较差异有统计学意义(P：0．006)， 两两比较C组与D组间差异有统计学意义(P=0．003)。其中，A组37．5％的 妊娠子宫手术区可见正常发育至晚孕期的胚胎，B组、C组手术区见胚胎、 胎盘枯萎现象。 II 中文摘要 结论： 1．利用实验动物sD大鼠构建子宫全层损伤后修复的模型，并进一步对不同损伤 程度的修复过程进行组织学、功能学评价； 2．大鼠子宫内膜上皮细胞有较强的再生能力，术后1周，不同损伤范围(O．5 ×0．5cm2～1．5