miR-445-3p调控肺癌细胞侵袭机制地研究.pdf

目录 一、摘要 中文论著摘要……………………………………………………………………1 英文论著摘要……………………………………………………………………9 二、英文缩略语………………………………………………………………………17 三、论文 谪订一言………………………………………………………………………………18 月lJ舌………………………………………………………………………………I芍 材料与方法………………………………………………………………………20 结果1．…………………………………………………………………………一28 小结………………………………………………………………………………31 结果2……………………………………………………………………………32 ／J、结………………………………………………………………………………41 讨论…………………………………………………………·…………………一42 结论………………………………………………………………………………49 四、本研究创新性的自我评价………………………………………………………50 五、参考文献…………………………………………………………………………51 六、附录 综述………………………………………………………………………………58 在学期间科研成绩………………………………………………………………75 致谢………………………………………………………………………………76 个人简介…………………………………………………………………………77 ·中文论著摘要· miR-455-3p调控肺癌细胞侵袭机制的研究 刖 昌 MiRNAs是内源性的、非编码、长度为20．25碱基的单链小分子RNA。通过 5’端种子区的2．8碱基，根据碱基配对原则，与mRNA的3UTR完全或不完全互 补，以“一对多”或者“多对一”的方式，转录后调控数量不等mRNA的表达，最终 抑制其蛋白质翻译，改变表型。miRNAs在诸多方面都发挥着重要的作用，参与 细胞发育、应激反应、病毒感染、癌症、心脏病等，影响几乎所有的信号通路， 是除转录因子以外，又一个起着重要的调控作用的大家族成员。 目前研究发现肿瘤中存在miRNAs表达失调，miRNAs以致癌基因或抑癌基 因作用来调节其他原癌基因或抑癌基因的表达。高表达者抑制抑癌基因发挥促癌 作用，例如MiR．21在肝癌中过表达，通过抑制抑癌基因PTEN发挥促癌作用；低 表达的miRNAs抑制癌基因发挥抑癌作用，例如Let．7在肺癌中失表达，失去了 对癌基因MYC的抑制作用而发挥抑癌作用。 本研究利用miRNA 表达谱进行检测，筛选出一组差异性表达10倍以上的miRNAs。首先，根据已有比 较基因组研究报道，miR．455—3p的基因组定位区域，是肺癌的遗传学变异区；其 次，miR．455．3p可能调控的靶基因多为肿瘤相关基因，可能调控的靶基因 与信号通路与肿瘤的关系密切；再者，miR．455．3p与靶基因调控位点的遗传保守 性强。另外，在miR．455．3p可能调控的靶基因中Smad2在肺癌中缺失表达，与肿瘤 的侵袭转移有关，并且基因水平突变率低，提示了Smad2的转录水平和蛋白水平 调控的不一致现象。Smad2作为TGF．B信号通路中的关键成员，也是其他多个信号 通路的交叉点，尤其是近来研究证实Smad2与上皮的问质转变过程以及肿瘤的侵 袭转移关系甚为密切，以抑癌作用参与恶性肿瘤的发生发展过程。这些现象似乎 提示Smad2有可能接受了miR．455．3p的高表达抑制，通过转录后调控，抑制了 Smad2的蛋白表达，促进了肺癌的侵袭转移。因此，我们提出miR-455。3p有可能参 与了肺癌的发生发展过程的假说，并且认为miI“55—3p可能通过Smad2调控肺癌细 胞侵袭。 本研究拟定通过两部分探igmiR455．3p如何参与调控肺癌细胞侵袭能力的变 化。首先，检钡W]miR．455—3p在非小细胞肺癌中表达的意义，以及与非小细胞肺癌 肺癌细胞的侵袭。 材料与方法 一、NSCLC病人及组织样品 织达5cm以上)为2008年至2009年中国医科大学附属第一医院及辽宁省肿瘤医 院收治的病人。64例有随访结果的非小细胞