蝎毒对帕金森病小鼠脑内多巴胺能神经元保护作用机制探讨.pdf

蝎毒对帕金森病小鼠脑内多巴胺能神经元 保护作用机制的探讨 硕士研究生： 刘纯青 指导教师： 高溪 副教授 指导小组： 张万琴 教授 专业名称： 生理学 摘 要 帕金森病(Parkinson’sdise鹊e，PD)是一种多发于中老年人的慢性神经系统退 neuron) 行性疾病，其特征性病理改变为黑质致密部多巴胺能神经元(dopaⅡ1ine味c 变性、坏死，继而引起纹状体多巴胺(dop锄ine，DA)含量降低。DA氧化应激． 自由基学说是DA能神经元损伤的重要机制，抗氧化治疗是目前公认的确实有效 的治疗PD的方案。也是今后应努力发展的方向。因此，寻找一种毒副作用小、效 果明显的抗氧化药物将具有重要的临床意义。 我们以往的工作发现蝎毒(scorpionvenom，SV)在体外实验中具有明显的抗 氧化和清除自由基的作用，同时还具有对抗谷氨酸(91ut咖ate，Glu)兴奋性神经毒 的作用，而氧化应激和兴奋性神经毒均参与了PD的发生发展过程，提示Sv可能具 有治疗PD的作用。本工作旨在用卜甲基一4一苯基一1，2，3，6～四氢吡啶 模型，观察SV对黑质致密部(substantianigrapars compacta，sNc)DA能神经元的保 护作用，并从治疗角度进一步探讨其可能的脑内细胞分子学机制。 日两次腹腔注射治疗13天，同时进行爬杆、悬挂、游泳行为学实验。上述动物断 头取脑，取纹状体，应用高效液相色谱法(岫曲per南锄孤celiquidchromato掣aphy， 聚甲醛固定后切取黑质部冠状脑片，免疫组织化学方法检测黑质酪氨酸羟化酶 (tyrosine acidic hydroxylase，TH)、胶质原纤维酸性蛋白(舀ia蕊rill8fyprotein， GFAP)的免疫反应活性。主要结果如下： 1．sv具有改善PD小鼠行为障碍的作用 爬杆、悬挂、游泳三项行为学结果显示，实验对照组(N口TP+Ns)小鼠均出现 量组尤为明显。 2．sv具有保护黑质致密部DA能神经元的作用 TH免疫组化结果显示：与空白对照组(Ns+Ns)比较，实验对照组(帅+Ns)小 验对照组(MPTP+Ns)(低剂量组pO．01：高剂量组p0．01)。 pO．01)，HvA，DA比值降至正常。 3．SV具有抑制黑质部星形胶质细胞增生的作用 小鼠中脑黑质部可见GFAP一取阳性星形胶质细胞明显增生(p0．01)；而实验给药 阳性星形胶质细胞的增生(低剂量组po．01；高剂量组p0．01)。 4．SV能增加纹状体内PDYNmRNA的表达 状体内PENKmRNA的表达水平显著增加(po．05)，而PDⅥqmIⅢA的表达水平 mRNA mRNA的 的表达水平均有不同程度的恢复，其中高剂量治疗组(加叮P+sv200)PDYN 表达恢复至显著水平(Do．05)。 结果表明：sV对PD小鼠黑质DA能神经元的形态与功能具有明显的保护作 用，其机制可能与纹状体内具有抑制小胶质细胞激活的D1yN表达增加有关。 关键词：帕金森病蝎毒MPTP中脑黑质部 THGFAPPENKPDYN Of VenOmOn Ef．fect ThePrOtectiveScOrpiOn DOpaminergic Mice inPD Neurons