《亚急性瘤胃酸中毒对瘤胃和瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的影响 Effects of Subacute Rumen Acidosis on Proliferation and Apoptosis of Rumen and Omasum Epithelial Cells》.pdfVIP

动物营养学报2013，25(11)：2612—2622 ChineseJournalAnimalNutrition of doi：10．3969／j．issn．1006-267x．2013．11．014 亚急性瘤胃酸中毒对瘤胃和瓣胃上皮细胞 增殖与凋亡的影响 邬宇航1’2殷兆丽3刘大程1’2+胡红莲4 高 民4刘国娟1’2 (1．内蒙古农业大学，呼和浩特010018；2．农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室，呼和浩特010018； 3．内蒙古医科大学，呼和浩特010110；4．内蒙古农牧业科学院动物营养研究所，呼和浩特010031) 摘 要：本试验旨在研究亚急性瘤胃酸中毒(SARA)对瘤胃和瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的影 响。选取8只健康的处于泌乳期关中奶山羊，按体重、泌乳量相近原则随机分为3组，对照组 采食青干草4周。取瘤胃、瓣胃黏膜组织，通过检测瘤胃、瓣胃黏膜蛋白质、DNA及RNA含量 来研究SARA对瘤胃、瓣胃黏膜生长的影响；通过检测增殖细胞核抗原、原位末端标记阳性细胞 数，研究瘤胃、瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的变化；并在透射电镜下观察细胞凋亡情况。结果表 核固缩、染色质边集化，有较多的凋亡小体形成。SARA组瘤胃及瓣胃上皮细胞增殖指数较对照 胃上皮细胞增殖活性有抑制作用，对上皮细胞凋亡有促进作用。 关键词：SARA；黏膜屏障；增殖细胞核抗原；细胞凋亡 中图分类号：$823 文献标识码：A 亚急性瘤胃酸中毒(SARA)是一种典型的能炎、溃疡，但这些症状对动物机体的损害是缓慢和 量代谢疾病，在饲养良好的奶牛和肉牛群尤为多 逐渐加重的，使动物长期处于亚健康状态，引起了 见和频发，对动物的健康和高效生产极其不利。 奶业从业者和科研人员的高度关注。近些年的研 虽然有众多学者对其发病机理作了大量的研究， 究发现，SARA可破坏瘤胃黏膜的完整性，其发病 但关于SARA发生的具体机制至今仍存在较大分机制与瘤胃黏膜屏障功能破坏，通透性增加密切 歧，需要更深入的研究。SARA是由于反刍动物长相关¨吨J。细胞增殖与凋亡是细胞生命活动的2 时间过食了大量的精料，精料中含有易发酵碳水 个重要过程，两者既对立又统一。正常组织的细 化合物(淀粉和葡萄糖)从而引发的一种能量代谢 胞处于不断增殖和不断凋亡的动态平衡状态，细 胞增殖与凋亡必须同步协调，才能维持黏膜的完 性疾病，且瘤胃液pH长时间在5．5～5．8之问波 动。SARA在临床上没有明显的特征表现，主要表整性，从而确保其功能正常。目前关于胃肠上皮 现在瘤胃内挥发性脂肪酸增加，瘤胃液pH降低， 细胞增殖、凋亡与疾病之间关系的研究多集中于 瘤胃乳头大面积脱落，最终导致瘤胃乳头出血、发 人类医学与单胃动物，在反刍动物的研究较少，关 收稿日期：2013-05-02 基金项目：国家自然科学基金30960252)；内蒙古农牧业科学院青年创新基金(2011QNJJM03) $通讯作者：刘大程，教授，硕士生导师，E—mail：nmgldc@163．com 万方数据 ll期 邬宇航等：亚急性瘤胃酸中毒对瘤胃和瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的影响 于SARA对瘤胃、瓣胃上皮细胞增殖与凋亡的研 究在国内外更是鲜见报道。为此，本研究通过逐 分为4期饲喂，通过饲喂NFC／NDF分别为1．02、 渐提高饲粮非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维 比(NFC／NDF)的方式来诱导奶山羊发生SARA，期15d；恢复组前期饲喂方法与SARA组相同，待 通过测定瘤胃、瓣胃黏膜蛋白质、DNA和RNA含SARA诱导成功后，让奶山羊自由采食青干草4 量增以及殖细胞核抗原(PCNA)和原位末端标记周，使试验奶山羊逐渐恢复。整个试验期，试验动 (TUNEL)阳性细胞数，探讨上皮细胞增殖与凋亡物采用单笼饲养，每天07：00和19：00分2次等量 在瘤胃、瓣胃黏膜屏障损害中的作用，为从细胞增 饲喂，自由饮水。 殖与凋亡角度深入了解SARA对瘤胃黏膜屏障功 试验饲粮参照NRC(1981)奶山羊营养需求 能的影响提供理论依据。 配制。试验饲粮