《5-氮-2#39;-脱氧胞苷对膀胱癌T24细胞株RUNX3表达及生物学行为的影响》.pdfVIP

·219· 壅垡塑垦生堕盟塑垄查!!!!芏!旦箜!鲞塑!塑』垦!!!!里P旦翌!里121盟鱼!!!：垒旦鲤!!!!!!!∑旦!!：塑!：1 实验研究 5一氮一2L脱氧胞苷对膀胱癌T24细胞株 RUNX3表达及生物学行为的影响 周琦周祥福 肖运政 张涛 王林 刘志华 674—4624．2009．04．009 doi：10．3870／j．issn．1 【摘要】 目的通过观察DNA启动子区域CpG岛去甲基化对T24膀胱癌细胞株runt相关转 factor3 录因子3基因(runt-related transcriptiongene，RUNX3)表达及对细胞生物学行为的影响， 探讨膀胱癌基因治疗的新靶点。 方法 甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR，MSP)和非 甲基化特异性PCR(un-methylationPCR，UMP)检测经特异性DNA甲基转移酶抑制剂5一 specific 甲基化状态；分别以0．5、5．0和50．0／zmol／L5-Aza-CdR处理T24细胞后，半定量RT—PCR检测细 胞RUNX3基因mRNA的表达，四唑盐(MTT)比色法观察细胞的增殖活性，流式细胞仪分析细胞 的凋亡状况。 结果膀胱癌T24细胞RUNX3基因启动子区域CpG岛存在甲基化现象，而经5一 Aza—CdR处理后未发现其甲基化；经不同浓度5-Aza-CdR处理后的T24细胞RUNX3mRNA重新 表达，且其表达量(O．51士0．06、0．60士0．04、0．69±0．08)与药物剂量呈正相关(F一102．21，P0． 01)；与对照组相比，经5-Aza-CdR处理后的T24细胞增殖明显受到抑制，凋亡增加(4．16％±1． 56％、25．82％土1．81％、41．77％士3．25％、66．59％±3．16％，P0．01)，且与药物存在剂量依赖关 系(F一316．47，P0．01)。 结论T24膀胱癌细胞株RUNX3基因启动子区域CpG岛的甲基化 可能是导致该基因表达沉默的主要原因，特异性DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR能够通过逆转 T24细胞RUNX3基因的异常甲基化，诱导该基因的重新表达而恢复其抑癌功能。 【关键词】膀胱肿瘤； RUNX3基因；5-氮一2’一脱氧胞苷；细胞凋亡 Effectsof 011 of and behaviorsofT24bladder expressionRUNX3 5-Azw2’-deoxycytidine biological cell cancerline Lin，LfU 518055，China Z矗i—hua．+DepartmentofUrology，XiliPeople’SHospital，Shenzhen Correspondingauthor：ZHoUXiang-fu，E-mail：xiangfuzhou@126．tom Toobservetheeffectof DNA island ex- of onthe [Abstract]Objective demethylationCpG ofrunt—related factor3 the ofT24bladdercancer pression transcriptiongene(RUNX3)and