《CD5-FC对KSHV肿瘤转化基因K12诱导NIH3T3转化细胞的杀伤作用》.pdfVIP

第 卷 第 期 病 毒 学 报 21 3 Vol.21 No.3 年 月 2 0 0 5 5 CHINESEJOURNALOFVIROLOGY Ma 2 0 0 5y ／ 对 肿瘤转化基因 CD 5-FC KSHV K l2 诱导NIH3T3 转化细胞的杀伤作用 唐桂霞，卢 春 （南京医科大学 微生物学与免疫学系，南京 210029） 摘要：采用分子克隆技术构建含卡波济肉瘤相关疱疹病毒（ ， ）转化基因 Ka osi/ssarcoma-associated 1er esvirus KSHVp p 和含胞嘧啶脱氨酶（ ）基因重组逆转录病毒表达质粒，分别命名为 和 。将 K12 CD LZRS-K12 pLXSN-Fc !Fury 质粒转染 细胞系，诱导细胞转化获得具有肿瘤细胞生物学特性的 ／ 细胞，进一步将 LZRS-K12 NIH3T3 N K12 质粒转染 ／ 细胞，获得含 基因的 ／ ／ 细胞。加入 氟胞嘧啶（ ）后，采用 pLXSN-Fc !Fury N K12 CD N K12 FF 5- 5-FC 法、流式细胞仪和免疫组化（ ）等方法，分别检测细胞存活率、凋亡率及凋亡相关蛋白的表达。结果显示， MTT IHC ／ ／ 细胞在使用 后存活率明显下降。流式细胞仪检测结果显示， 作用后的 ／ ／ 细胞的凋 N K12 FF 5-FC 5-FC N K12 FF 亡率与作用前相比增加了 。与此同时，经 作用后的 ／ 和 ／ ／ 细胞的生长周期发生了明显 4.6 5-FC N K12 N K12 FF 变化，均表现为 期细胞比率降低，和 期细胞比率增高。 使得 ／ 细胞的增殖主要阻滞在 G0-G1 S G2-M 5-FC N K12 期，而 ／ ／ 细胞的增殖主要阻滞在 期。 检测结果表明，／ 细胞在 使用前后 和 G2-M N K12 FF S IHC N K12 5-FC Fas 表达改变均不明显；而 ／ ／ 细胞在 使用后的 和 表达水平均明显高于 使用前的水 Fas-L N K12 FF 5-FC Fas Fas-L 5-FC 平。提示， ／ 对 肿瘤转化基因 诱导 转化细胞具有杀伤作用；凋亡有可能介导了部分杀 CD 5-FC KSHV