《DNA-过氧化聚吡咯生物复合膜传感器的分析应用》.pdfVIP

VOI. 28 高 等 学 校 化 学 学报 NO. 3 2 0 0 7 年3 月 CHEMICAL JOURNAL OF CHINESE UNIVERSITIES 450 ~ 452 ［研究简报］ DNA-过氧化聚吡咯生物复合膜 传感器的分析应用 蒋晓华，刘伟强，陈建军 （深圳清华大学研究院新材料与生物医药研究所，深圳518057 ） 关键词 DNA 生物传感器；过氧化聚吡咯；多巴胺；5-羟色胺 中图分类号 O657 ；@523 文献标识码 A 文章编号 0251-0790 （2007 ）03-0450-03 ［1］ ［2 ］ 关于DNA 与导电高分子 及功能化纳米粒子 相互作用的研究工作已有很多报道，其中将DNA ［3 ，4 ］ 固载到聚吡咯（PPy ）膜中制备传感器更是近年来的研究热点 ，但这些工作均是在PPy 膜的导电状 态下进行的. PPy 过氧化后会变成一种具有疏松多孔结构的绝缘膜. 我们以此为模版引导DNA 固载， 该方法可广泛适用于不同类型的DNA. 目前还未见这方面的报道. 神经递质的电化学检测常常受到生理环境中共存物质尤其是抗坏血酸（AscOrbic acid ，AA ）的干 ［5 ，6 ］ ［7 ，8 ］ DA ）和AA . 我们 在研究DNA 与儿茶酚胺类分子 扰，采用聚苯胺修饰电极可同时检测多巴胺（ 之间相互作用的基础上，以碳纤维电极（CFE ）为基底，制备了一种新型的DNA-过氧化聚吡咯（PPyOx ） 生物复合膜传感器，与单一的DNA 或PPyOx 修饰层相比具有更高的灵敏度和选择性. 1 实验部分 1. 1 试剂 天然小牛胸腺DNA（CTDNA ，华美生物技术公司），吡咯、DA 、5-羟色胺（5-HT ）及AA 均 购自Sigma 公司. 健康人的全血样本由安徽医科大学第一附属医院提供. 1. 2 实验过程 先将吡咯单体聚合在CFE 表面得到PPy/ CFE. 然后在一定电压下进行过氧化，得到PPyOx/ CFE. 最后将该电极浸入到0. 1 mg/ mL 的CTDNA 溶液中进行电沉积，得到DNA-PPyOx 生物复合膜修饰的 CFE（DNA-PPyOx/ CFE ）. 2 结果与讨论 2 . 1 DNA-PpyOx 生物复合膜的表征 在DNA 电沉积过程中，充电电流初始衰减很快，衰减至一定程 度后又呈上升趋势，表明DNA 分子穿过PPyOx 膜的孔穴固载到CFE 表面上，而不是沉积在PPyOx 膜 上，否则将不会有沉积电流产生. 用AFM 研究了PPyOx 膜和 DNA-PPyOx 复合膜形貌上的差异，结果如图1 所示. PPyOx 膜表面比较 粗糙，紧密分布着一些直径小于5 nm 的微孔结构［图1（A ）］. 由于DNA 的沉积，这些孔穴被填充，得 到一个比较平滑致密的复合膜 DNA-PPyOx ［图1 （B ）］. PPyOx 膜的厚度对 DNA 的固载很重要，从 图1（A ）中可以估测膜厚度小于10 nm. CTDNA 链虽然直径只有2 nm ，却长达8 !m ，因此只有很少一 部分DNA 链能够进入到PPyOx 膜的孔穴中，大部分链则留在膜外，压缩聚集形成“鼓包”［图1（B ）］. X 射线光电子能谱检测结果也证实DNA 已固载到PPyOx 模板里. 2 . 2 DA 和5-HT 混合物的电化学行为