多环芳烃PAHs对海洋鱼类胚胎发育的毒性效应的研究.pdf

摘要 多环芳烃(PAHs)对水生生物的毒性作用机制一直是生态毒理学研究的热点 和难点。本文则主要研究了不同多环芳烃对海洋鱼类胚胎的发育毒性效应。通过 nitens 对两种海洋鱼类—斜带髭鲷(Hapalogenys 暴露，比较研究了不同组成和结构的多环芳烃对鱼类胚胎发育不同阶段作用的敏 感度差异以及特异的生理学和形态学损伤；同时，通过活体测定BaP暴露真鲷 PCR (Pagrusmajor)胚胎的EROD活力、双向电泳分析蛋白表达差异，以及Real．time 化指标的响应及其相互联系，初步探讨了PAHs对鱼类胚胎发育的毒性作用机制。 取得如下结果： 1)．鱼类胚胎孵化之前对三种PAils暴露最为敏感的阶段为囊胚一原肠胚阶段， 而仔鱼对污染物的暴露较整个胚胎阶段更为敏感，死亡率相对孵化之前其他阶段 更高。不同组成与结构PAHs对鱼类胚胎发育的毒性有所差异，BaP暴露与仔鱼死 亡率有明显的剂量效应关系，而Phe和An暴露浓度与胚胎的死亡和畸形率没有明 显的相关性，但二者在接近水体溶解极限的浓度同样表现出较强的毒性；Bap能 够引发仔鱼一系列的异常症状，主要有：脊柱弯曲和围心腔水肿；Phe暴露导致胚 胎围心腔和卵黄囊水肿，An对胚胎的畸形效应不明显。三者对于胚胎心率和孵化 时间的影响也各不相同。 着明显的剂量效应关系，BaP浓度为O．8“g／L时已经开始被诱导，活性最大值出现 度的升高EROD活性呈正相关上升，证实胚胎EROD活性可以做为BaP暴露的敏 感性生物标志物。 3)双向电泳实验发现BaP暴露的真鲷胚胎在发育的两个阶段36h和72h，其 表达的蛋白无论是在表达种类还是含量上相对于对照组都有较大变化。BaP暴露 的真鲷胚胎在36h与72h阶段蛋白质主要分布在pH3．7之间，胚胎更多的为酸性 7 --30KDa区域内同样也出现了一组新蛋白。72hBaP暴露的真鲷胚胎在PI范围7．0 分子量10一20I①a也出现了一组表达量较高的新蛋白。 4)．BaP暴露的真鲷胚胎CYPlAmRNA表达与AHR2有着非常相似的趋势，而 CYPlA与AHR2 AHRl则与CYPlA的表达没有相关性。Bap暴露的真鲷胚胎在36h 表达都被显著诱导，并且与暴露浓度有明显的剂量效应关系，二者同时在1．299／L 暴露组出现了三个时相内诱导的最大值，但二者1．8,g／L暴露组的表达相对于对照 后开始降低，伴随着两者基因表达量的降低的同时，胚胎出现的高死亡率，而AHRl 的表达在三个时相内并没有显示出被抑制。AHR2的表达在各时间段内对照组和暴 的表达最高值出现在36h，随后表达水平降低，而AHRl表达的最高值则出现在 132h，此前暴露组和对照组表达量都很微弱。表明AHR2是AHR主导的同工型基因， 并且CYPlA／AHR2很可能是Bap对胚胎发育毒性调控的主要因素。 8 ABSTRACT This studiedthe ofPAHsonthe paper developmentaltoxicity marinefish embryos． Twokindsofmarine nitens Richardsonand fishes(Hapalogenys were tothreedifferentPAHs．InOVOERODWas embryosexposed measuredtodetect the IA