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植物的克隆 问题1：为什么胡萝卜根的培养细胞能培养成一个完整的胡萝卜植株呢？ 植物细胞的全能性。 有些植物在多次继代培养后，会丧失细胞全能性的表达能力 原因：1.遗传物质发生不可逆转的改变。 2.激素平衡被打破或外源激素作用的结果。 3、细胞对外源生长物质的敏感性发生改变。 植物组织培养的培养基 无机营养物质：植物所必需的大量元素及微量元素 有机营养物质 ① 含N物质：包括维生素和氨基酸 ② 碳源：2%—5%的蔗糖 ③ 琼脂：起凝固支持作用 植物生长调节剂：（生长素，细胞分裂素） PH值：5.0－6.0 5.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（ ） A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 植物的克隆（第二课时） 提取目的基因 （发光基因） 目的基因与运载体结合 导入受体细胞 （原生质体） 特定性状的植株 （发光植株） 原生质体培养 植物细胞工程操作过程： * 选修３ 现代生物科技专题 1958年,斯图尔德(F.C.Steward 、美)胡萝卜组织培养 开花的胡萝卜植株 胚状体 胡萝卜根的切片 从根切片分离的细胞 愈伤组织 试管植株 离体、消毒的植物器官、组织或细胞 植物体 根、芽 愈伤组织 脱分化 胚状体 再分化 问题2：什么是细胞的全能性？为什么具有全能性？ 植物体的每个细胞都具有植物体的全部遗传信息，具有发育成为完整个体所必需的全部基因。 １、概念： 　 2、原因： 3、细胞全能性大小的顺序： 植物细胞 动物细胞（核） 植物体的每个活细胞具有遗传上的全能性,都具有发育为完整植株的潜能。 一、植物细胞的全能性 受精卵 生殖细胞 体细胞 ＞ ＞ 不同种类植物或同种植物的不同基因型个体之间因遗传性的差异,细胞全能性的表达程度大不相同. 克隆成功所需的条件： 1.探讨特定植物细胞全能性表达的条件(激素配比) 2.选择性能优良、细胞全能型表达充分的基因型 外植体 愈伤组织 脱分化 再分化 植物组织培养的过程 （分化） 胚性细胞特点？ （未分化） 优点？ 繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 幼苗无毒 保持优良性状 ①适宜温度、光照、 pH和无菌环境。 ②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素和赤霉素） 胚性细胞 胚状体 幼苗 植物体 条件 特点？ 相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织 问题3：植物的培养细胞是如何培养成一个完整的植物？ 二、植物组织培养程序 1、配制半固体培养基 2、无菌操作切取一些小块组织 3、获得愈伤组织 4、再生新植株出现 脱分化 通过调节营养物质和植物生长调节剂的适当配比，诱导愈伤组织再分化 再分化 愈伤组织 摇床： 由恒温培养箱和振荡器组合而成，专为细胞培养提供控制和均衡的培养条件而设计，特别是悬浮液培养应用。 超大容量恒温双层摇床 恒温摇床 使用顺序影响实验结果：先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化；先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂也分化；同时使用分化频率提高。 激素用量的比例影响实验结果：生长素用量比细胞分裂素用量比值高时，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化，抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。 资料： 问题4：是不是所有植物体的培养细胞都能发育成相应的完整的植物呢？ 1、所有的植物细胞都具有全能性 2、植物的培养细胞发育成一个完整的植株是需要条件的。 全能性的表达条件： ②离体状态 ①营养物质、激素、其它外界条件（灭菌、PH等）； 思考讨论：为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ 基因在特定空间和时间条件下选择性表达的结果。在个体发育的不同时期，生物体不同部位的细胞表达的基因是不同的，合成的蛋白质也不一样，从而形成了不同的组织和器官。 植物组织培养的应用 胚芽 胚根 胚乳或子叶 （1）试管苗的快速繁殖 （2）无病毒植物的培育 （3）提取原料（药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂等） （4）人工种子 （5）转基因植物的培育 现在已有胡萝卜、芹菜、柑橘、咖啡、棉花、玉米、水稻、橡胶等几十种植物的人工种子试种成功，但由于成本较高，中国尚未应用于生产。 应用1：某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外共他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是什么？ 污染主要来源于组织培养所用的离体组织； 污染主要不是培养基灭菌时间短造成的； 调节培养基pH