修饰动物模型的建立与应用.ppt

第二十二章 常用分子生物学技术的原理及应用 The Popular Technology in Molecular Biology: Principle and Application 第 一 节分子杂交与印迹技术Molecular Hybridization Blotting Technology 核酸分子杂交的原理 带有某种标记的核酸单链作为探针，在一定条件下， 按碱基互补配对原则与互补的核酸单链退火形成双链杂交体， 鉴定靶序列的存在、分子大小或进行靶序列的相对定量分析。 核酸分子杂交的杂交动力学 核酸分子杂交 核心序列形成 自发过程 探针的来源 基因组DNA探针 cDNA探针 RNA探针 寡核苷酸探针 核酸杂交技术 （一）Southern Blot 原理 斑点印迹杂交(Dot blot) 斑点印迹 优点简单、迅速；核酸粗提、多样品检测 缺点不确定分子量、特异性不高，假阳性 原位杂交 （In Situ hybridization） 标记的核酸探针与组织切片或细胞中的待测核酸中的互补序列杂交。 1969, Pardue --爪蟾核糖体基因探针 1970, Orth 兔乳头状瘤病毒cDNA探针 Weste